微生物的实验室培养SK.ppt

;常见的三种细菌典型形态

A.球菌B.杆菌C.弧菌;细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质，细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。;芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。

芽孢又小又轻，可以随风飘散。

当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.;现在是5页\一共有70页\编辑于星期三;1.何为培养基？;液体培养基：不加琼脂。用于工业生产。

半固体培养基：液体培养基中加少量琼脂。用于观察细菌运动、鉴定和保藏菌种。

固体培养基：在液体培养基的基础上添加较多琼脂。用于微生物的分离、计数和鉴定;液体培养基;半固体培养基;固体培养基：菌落，菌苔;2、按功能分：;加入青霉素的培养基:

不加氮源的无氮培养基:

不加含碳有机物的无碳培养基:

;3、按化学成分：;???二）不同的微生物的生长往往需要采用不同的培养基配方;除上述几种主要营养物质的基础上，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质（如维生素、碱基、某些氨基酸）以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。;（四）配制原则;1.何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？;(一)无菌技术的概念;2.无菌范围：;耐高温需保持干燥的物品，160～170℃1～2小时;现在是21页\一共有70页\编辑于星期三;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？;1．关于微生物营养物质的叙述中，正确的是

A、是碳源的物质不可能同时是氮源

B、凡碳源都提供能量

C、除水以外的无机物只提供无机盐

D、无机氮源也能提供能量;2．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是

A、防止杂菌污染

B、消灭杂菌

C、培养基和发酵设备都必须灭菌

D、灭菌必须在接种前;编号;（3）若除去成分②，加（CH2O），

该培养基可用于培养。

（4）表中营养成分共有类。

（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行是。

（6）右表中各成分重量确定的原则是。

（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是。;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方;灭菌:

将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170℃下灭菌2h。;1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？;倒平板技术;倒平板技术;2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？;倒平板技术;倒平板技术;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？;

无菌检查：

将未接种的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。

2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种.

;（二）纯化大肠杆菌;单个

或少数菌体;平板划线的操作方法;现在是41页\一共有70页\编辑于星期三;现在是42页\一共有70页\编辑于星期三;;;现在是45页\一共有70页\编辑于星期三;;;;;;;;现在是53页\一共有70页\编辑于星期三;问题讨论;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;稀释涂布平板法;1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按101~106的顺序编号。;2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。;3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。;注意：

移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处.;现在是61页\一共有70页\编辑于星期三;现在是62页\一共有70页\编辑于星期三;现在是63页\一共有70页\编辑于星期三;现在是64页\一共有70页\编辑于星期三;涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？;菌种的保存;四、课题成果评价;（二）接种操作是否符合无菌要求