第八章液相色谱.pptVIP

包括：进样口、注射器、六通阀和定量管等。它的作用是把样品有效的送入色谱柱中。进样系统是柱外效应的重要来源之一，为了减少对板高的影响，避免由柱外效应而引起峰展宽，对进样口要求死体积小，没有死角，能够使样品象塞子一样进入色谱柱。二、进样系统第29页，共55页，星期日，2025年，2月5日包括：色谱柱，柱温箱和连接阀等。色谱柱色谱柱包括柱管和固定相两部分。柱材料要求耐高温，内壁光滑，管内径均匀，无条纹或微孔等；最常用的是不锈钢管。柱温箱柱温是液相色谱的重要操作参数。在较高的柱温下操作的优点：1.能增加样品在流动相中的溶解度，缩短分析时间，柱温升高6℃，组分保留时间约减少30%；2.减少传质阻力，增加柱效；3.降低流动相粘度，在相同流量下，降低柱压。液相色谱常用柱温范围为室温65℃。三、色谱分离系统第30页，共55页，星期日，2025年，2月5日四、检测记录数据系统包括：检测器、记录仪和微型数据处理机。常用的检测器为：示差折光检测器，紫外吸收检测器，荧光检测器，二极管阵列检测器等。记录和数据处理系统与气相色谱仪相同。第31页，共55页，星期日，2025年，2月5日一、液-固色谱固定相二、液－液色谱固定相三、离子交换剂固定相四、凝胶色谱固定相第四节高效液相色谱固定相第32页，共55页，星期日，2025年，2月5日是以硅胶为基体的各种类型的硅珠。主要有全多孔微粒型硅珠、多孔层硅珠和堆积型硅珠。1、全多孔硅珠，最初使用的是粒度30～70μm的全多孔硅珠，比表面积大约100～400m2/g。优点：孔径大而深，粒度大，易于装柱；比表面积大、柱容量大，允许较大进样量；制作工艺简单，成本也低。缺点：孔径深，传质阻力大，柱效不高。现在多用粒度为5～10μm的全多孔微粒型硅珠，在柱效或柱容量方面都有大大提高。一、液-固色谱固定相第33页，共55页，星期日，2025年，2月5日2、多孔层硅珠：也称表面多孔硅珠或薄壳硅珠。它是在粒度为30～50μm的硅珠表面上，覆盖一层多孔性基质，厚度为1～2μm。优点：孔浅，传质阻力小，柱效较高；流动性好，可用于干法装柱。缺点：比表面积小，只有1～20m2/g，样品容量小，易发生过载现象。只适用于高灵敏度检测器。液-固色谱固定相第34页，共55页，星期日，2025年，2月5日3、堆积型硅珠：将颗粒极细的硅珠经一定工艺，凝聚成5～10μm的堆积硅珠。优点：粒度分布窄、粒径接近，比表面积大，柱渗透性小，柱效高，压力低。缺点：制造工艺复杂，价格昂贵。微粒型全多孔硅珠和堆积型硅珠具有传质快，柱效高，容量大的优点，已成为液－固色谱常用的固定相，普遍取代了多孔层硅珠。液-固色谱固定相第35页，共55页，星期日，2025年，2月5日不同土壤，不同磷源30mm二、液－液色谱固定相主要为化学键合固定相。以硅珠为基质，利用硅珠表面的硅醇基团与键合基反应加工而成。优点是：1、在表面键合了有机物基团，消除了表面的吸附活性点，使表面更均一。2、可以通过改变键合不同的有机分子基团来改变选择性。3.?柱效高，固定液不流失，提高了柱子的稳定性和使用寿命。4.由于牢固的化学键，能耐各种溶剂，有利于梯度淋洗和样品的回收。第36页，共55页，星期日，2025年，2月5日三、离子交换剂固定相离子交换剂固定相的基质有两种类型：一种是以硅胶微球；另一类是苯乙烯与二乙烯基苯的共聚物。强酸性阳离子交换树脂的交换基为磺酸基，弱酸性的羧基。强碱性的阴离子交换树脂基为季铵盐，弱碱性的为-NH(R)2CI。主要类型：薄壳玻珠～苯磺酸、薄壳玻珠～乙基苯磺酸、薄壳玻珠～丙氨基丙酸、堆积硅珠～丙氨基丙酸、薄壳玻珠～丙基苄基二甲胺氯等。第37页，共55页，星期日，2025年，2月5日按化学类型可分为软性，半软性，刚性凝胶。软性凝胶在高的流速下会被压缩，并会从柱末端挤压出来，只适用于低流速的液相色谱。半软性凝胶可用于高效液相色谱，但压力不能超过150kg/cm2。刚性凝胶为多孔硅胶，它们近于纯的SiO2,其孔径按不同方法形成。多孔硅胶表面上有酸性基团，能与某些样品作用，需进行表面处理。四、凝胶色谱固定相第38页，共55页，星期日，2025年，2月5日在液相色谱中，许多溶剂都可用作流动相。第五节、液相色谱流动相一、对流动相的要求1.对色谱柱、固定相和分离组分要有惰性。2.对样品有较大的溶解度。3.对所选用的检测器没有干扰。4.粘度小。