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微生物检验中支原体分类、特性及检验方法.pdf

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支原体及检验

—、概述

支原体是一类无细胞壁、呈高度多形态性,能通过除菌滤器,在人工培养基上能生长繁殖的最小原核

型微生物。

(一)分类与命名支原体种类繁多,分布广泛。支原体科分为支原体和脲原体两个属。在支原体属中,对

人类有致病性的主要为支原体、人型支原体、生殖道支原体、穿通支原体等;而脲原体属解脲脲原体

(也称溶脲脲原体)对人类有致病。

(二)生物学特性

1.形态与结构支原体微小,大小约0.2~0.3μm,呈高度多形态,有球形、杆形、分支丝状等。

革兰染色为,但不易,常用吉姆萨染色。

无细胞壁仅有细胞膜是与细菌区别的主要特点。支原体的细胞膜,由外、中、内三层所组成,内外两

层主要为蛋白质,中间层系脂质,其中胆固醇类含量高。凡能作用于胆固醇的物质如二性霉素B、皂素及洋

地黄苷均可破坏细胞膜致其。

2.培养特性支原体大多数需氧或兼性厌氧,通常在含95%N2、5%CO环境中生长良好。营养要求较一般

2

细菌高,可在含牛心浸液、马与酵母浸液的培养基上生长。支原体与脲原体对最适pH要求不同。

支原体的菌落特征与细菌L型菌落极相似,37℃培养3~10天可形成直径为0.2~0.5mm大小的菌落,

用低倍镜观察,菌落呈“荷包蛋”样,即部分较厚,不透明,向下长入培养基内,周边为一层薄薄的

透明颗粒区。

支原体有许多特性与细菌L型相似,如多形性、可通过滤菌器、对低渗敏感、菌落呈“荷包蛋”样。两

者不同点在于细菌L型在无抗生素等诱导因素作用下,易返祖为原菌,而支原体为独立的一类微生物,不出

现返祖现象。

3.生化反应常以发酵葡萄糖、水解精氨酸和尿素等生物学特性不同,作为初步鉴别支原体的依据。

支原体、生殖道支原体等可分解葡萄糖产酸不产气,人型支原体等不能分解葡萄糖,但可利用精氨酸产NH3

解脲脲原体不能利用葡萄糖和精氨酸,但可利用尿素作为能源,分解尿素产碱。

四氮唑还原能力、亚甲蓝抑制、溶解红细胞、吸附红细胞等生物学特性不同,作为支原体进一步鉴别

的依据。

4.抗原成分支原体的抗原性主要来自细胞膜,其外层蛋白质是主要的型特异性抗原,具有免疫原性。

生长抑制试验(GIT)和代谢抑制试验(MIT)利用针对此抗原的型特异性来抑制支原体在培养基上生

长,可将支原体分成若干型。

5.抵抗力支原体对热的抵抗力一般与细菌相似,有的较弱。45℃经15~30分钟或55℃经5~15分钟

即告。支原体耐冷,不耐干燥。支原体对一些化学物质比细菌敏感,容易被重金属盐类、苯酚、来苏

儿等化学剂灭活。

支原体因无细胞壁,对渗透压敏感,对作用于细胞壁的抗生素,如青霉素、头孢菌素等不敏感,对抑

制或影响蛋白合成的抗生素如四环素、红霉素等敏感。

(三)微生物检验由于支原体无固定形态,染色结果不易与标本中的组织碎片等杂物区别,故取患者

标本直接镜检对各种支原体的诊断意义不大。微生物检验方法主要靠分离培养与学检验。

二、支原体

(一)生物学特性菌体呈短细丝状,长约2~5μm,典型的形态类似酒瓶状。吉姆萨染色呈淡紫色。

分离培养的最适pH为7.6~8.0。P1蛋白是支原体的主要特异性免疫源,是目前学诊断的主要抗

原。

(二)致病性支原体可从口腔、呼吸道分离到,主要通过飞沫,是人类性型性

的主要病原体之一。儿童和青年易感,首先引起上呼吸道,然后下行。病理变化主要是间质性肺

炎、急性细支气管炎。还可引起肺外并发症。

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