第十三讲蛋白质分子设计.ppt

一、抗体剪裁;一、抗体剪裁;1、抗体的人源化

新的挑战：

改造鼠源McAb基因，综合人—鼠嵌合McAb的优点；

获得特异性高、异源性小的，具有临床应用价值的抗体。

为何要人源化？

相对于“人”杂交瘤细胞系统，“鼠”杂交瘤细胞生长快，产生抗体量大。

鼠McAb用于人体，免疫原性和相对缺乏恒定区依赖的功能效应，使它的应用受到了一定的限制。

改造的必要性：

对鼠源McAb进行蛋白质工程改造，合成人源化单抗。;（1）鼠单克隆抗体恒定区的人源化

将小鼠McAb恒定区用人抗体恒定区代替而拼接成嵌合抗体，既具有抗原结合特异性，又极大地降低了鼠单克隆抗体的异源性。

改造策略和程序：

①克隆鼠McAb可变区基因——从鼠杂交瘤

提取mRNA→可变区基因cDNA文库→表达载体→抗原特异性筛选→可变区基因；

②选择合适的人恒定区基因；

恒定区基因比较保守，易于克隆获得

③重组载体的构建与表达

抗体分子的糖基化和可变区的折叠、链内二硫键形成，

以及重链和轻链相互作用形成正确的立体构象。

常用哺乳类细胞表达系统;CH3

;（2）人改型抗体（互补决定区移植）

问题提出：

人源化嵌合抗体的可变区仍具有抗原性。能诱发人产生抗小鼠抗体，导致过敏反应，需对人源化抗体的可变区再进行改造。

抗体可变区组成：

互补决定区（CDR）和骨架区组成。CDR：识别抗原表位的区域，直接决定了抗体的特异性；骨