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- 2025-10-17 发布于广东
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第一节基因工程的基本内容第1页,共28页,星期日,2025年,2月5日定向基因改造设想设想一能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮?能否让细菌“吐出”蚕丝?设想二能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物?设想三经过多年的努力,科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程第2页,共28页,星期日,2025年,2月5日一基因工程的基本内容主要内容1)基因工程的概念2)基因操作的工具3)基因操作的基本步骤第3页,共28页,星期日,2025年,2月5日什么叫基因工程?基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。(一)基因工程的概念第4页,共28页,星期日,2025年,2月5日(一)基因工程的概念基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程结果实质基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平人类需要的基因产物提取→拼接→导入→表达基因重组第5页,共28页,星期日,2025年,2月5日基因工程培育抗虫棉的简要过程:(一)基因工程的概念普通棉花(无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因与运载体DNA拼接导入棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)上述培育抗虫棉的关键步骤是什么?第6页,共28页,星期日,2025年,2月5日基因工程培育抗虫棉的关键步骤:关键步骤一:抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来关键步骤二:抗虫基因与运载体DNA连接关键步骤三:抗虫基因导入受体(棉花)细胞第7页,共28页,星期日,2025年,2月5日解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?(二)基因操作的工具关键步骤一的工具:关键步骤二的工具:关键步骤三的工具:基因的剪刀——限制性内切酶基因的针线——DNA连接酶基因的运载工具——运载体第8页,共28页,星期日,2025年,2月5日基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶)(二)基因操作的工具限制性内切酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶,能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。特点:特异性。即一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。第9页,共28页,星期日,2025年,2月5日基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶)(二)基因操作的工具大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。限制酶第10页,共28页,星期日,2025年,2月5日基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶)(二)基因操作的工具限制酶第11页,共28页,星期日,2025年,2月5日什么叫黏性末端?(二)基因操作的工具被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。第12页,共28页,星期日,2025年,2月5日要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?(二)基因操作的工具要切两个切口,产生四个黏性末端。如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢?会产生相同的黏性末端,然后让两者的黏性末端黏合起来,就似乎可以合成重组的DNA分子了。第13页,共28页,星期日,2025年,2月5日基因的针线——DNA连接酶(二)基因操作的工具DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了。第14页,共28页,星期日,2025年,2月5日外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)?(二)基因操作的工具导入过程需要运输工具——运载体。第15页,共28页,星期日,2025年,2月5日基因的运载工具——运载体:(二)基因操作的工具常用的运载体主要有两类:1)细菌细胞质的质粒2)噬菌体或某些动植物病毒第16页,共28页,星期日,2025年,2月5日基因工程过程示意图①从细胞中分离出DNA①②③④⑤⑥②限制酶截取DNA片断③分离大肠杆菌中的质粒④DNA重组⑤用重组质粒转化大肠杆菌⑥培养大肠杆菌克隆大量基因第17页,共28页,星期日,2025年,2月5日四个基本步骤:(三)基
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