原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
PAGE2
2020年4月19日
烟草蚀纹病毒蛋白酶说明书
文档仅供参考，不当之处，请联系改正。
TEVProtease
产品概述
TEVProtease(烟草蚀纹病毒蛋白酶；Tobaccoetchvirusprotease)是来源于烟草蚀纹病毒(TEV)Nla的重组蛋白酶，此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV蛋白酶具有很强的位点特异性，能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly)，最普通的是ENLYFQG，其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。该酶在PH5.5-8.5和4-30℃的广泛范围内皆有活性，使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。该酶带有His-sumoTag经6×His标签纯化，剪切反应完毕后可经过Ni-NTA（产品货号：PAN001）去除。本蛋白酶来源于大肠杆菌重组表示。
酶活性单位定义
在1XTEVBuffer(50mMTris-HCl,pH8.0,0.5mMEDTA,1mMDTT)中，30℃条件下反应1小时，能够切割3μg的反应底物达85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
产品溶液组分
TEVprotease储存液
10XCleavageBuffer
25mMTris-HCl，pH8.0
500mMTris-HCl，pH8.0
150mMNaCl
5mMEDTA
1mMEDTA
10mMDTT
5mMDTT
50%（V/V）Glycerin
推荐反应体系
反应物组成
体积
融合蛋白
50μg
TEVProtease
2μl（10U/μl）
10XTEVBuffer
10μl
ddH2O
至100μl
不同温度下的参考反应时间：
4℃反应16小时
20℃反应6小时
30℃反应2小时
活性测试
待测融合蛋白100μg，加入TEVprotease2μl，4℃反应16小时，取酶切前后样品SDS检测，如右图所示90%融合蛋白被切割。
储存条件
长期储存于-80℃，可保存2年；或小量分装后保存于-20℃，可保存6个月，避免重复冻融。10XTEVBuffer置于-20℃保存。
包装规格
货号
规格
RPP002-100
100U
RPP002-500
500U
RPP002-
U
文档评论（0）