日照海洋工程邢孟欣01课件.pptVIP

增强养殖品种的抗病能力疫苗、免疫调节剂研发机体免疫调节剂，科学使用于养殖生产中，刺激养殖动物机体的非特异性免疫系统，促进和诱发宿主防御反应，对于提高养殖动物非特异性免疫具有非常重要的作用。以中草药提取物、海藻多糖、香菇多糖、黄芪多糖、几丁质、糖蛋白、酵母多糖等为主要成分的组成药物在生产中已经被认可具有明显增强鱼类品种的细胞活动性，促进非特异性免疫因子的基因表达。核酸杂交技术核酸杂交是利用特异性的标记DNA片段为指示探针,与其互补链退火杂交,从而达到检查核酸样品中特定基因序列的检测。在探针的长短方面,则分为全染色体探针、PCR合成的长链探针及寡核苷酸探针。按杂交的方式可分为打点杂交、斑点杂交、Southern转移杂交和原位杂交等。根据核酸分子探针的来源和性质分为基因组DNA探针、cDNA探针、RNA探针及人工合成寡聚核苷酸探针等灵敏度高、特异性强、诊断速度快和操作较为简单。近年来在对虾病毒等病毒性病原体检测中倍受青睐。PCR技术PCR(PolymeraseChainReaction)即聚合酶链式反应,一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。该方法可使极微量的目的基因或特定的DNA序列在短短几个小时内扩增至百万倍。当我们知道待检病原具有某一特定基因片段时,即可利用特异的引物对样品中微量的目标DNA进行PCR扩增,通过电泳检测扩增出的特定片段,即可确定感染的病原。PCR技术PCR技术分类特点一步法PCR不够敏感，潜伏感染样品难以检出套式PCR敏感性高，但操作繁琐，检测时间长，容易污染环境，且不可定量定量PCRSYBGreen染料法敏感性高，快速，可定量，但易出现假阳性Taqman探针法可定量，快速，探针长度太长，敏感性不佳Taqman-MGB探针法敏感性高，快速，可定量，造价相对较高LAMP法灵敏、快速，不需要特殊仪器，但易出现假阳性DNA指纹技术DNA指纹是指限制性酶消化产物在电泳图谱或Southern杂交中产生的一系列带纹,不同带纹代表了在染色体不同位置上的不同长度的DNA序列。目前在病原微生物检测上应用的DNA指纹技术主要包括限制性片段长度多态性,扩增片段长度多态性和随机扩增多态性DNA等技术。利用扩增片段长度多态性指纹技术成功研究了对虾不同发育期的孵化场及虾池中的病原微生物动力学变化,为预防不同发育期对虾的主要病原菌提供了依据。基因芯片技术基因芯片技术是将各种基因寡核苷酸点样于芯片表面,微生物样品DNA经PCR扩增后制备荧光标记探针,再与芯片上寡核苷酸点杂交,最后通过扫描仪定量并分析荧光分布模式来确定检测样品是否存在某些特定微生物。基因芯片技术可以对环境中的微生物实现高通量和并行检测。它在理论上可以在一次实验中检出所有潜在的致病原,可以用同一张芯片检测某一致病原的各种遗传学指标;同时具有灵敏、特异和快速便捷等优点,因而在致病微生物检测中有很好的发展前景。免疫学检测技术免疫学检测技术是利用抗原抗体间能发生特异性免疫反应的原理来检测病原。免疫学检测免疫学酶技术免疫酶技术利用了抗原-抗体反应的高度特异性和酶促反应的高度敏感性,通过肉眼或显微镜观察及分光光度计测定,达到在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的部位,以及对其进行定量的目的。酶联免疫吸附试验(ELISA)是目前应用最广泛的固相免疫酶测定技术。免疫荧光技术免疫荧光技术是利用某些荧光素通过化学方法与特异性抗体结合制成荧光抗体,荧光抗体与被检抗原特异性结合后,形成的免疫复合物在一定波长光的激发下可产生荧光,借助荧光显微镜可检测或定位被检抗原。免疫荧光技术将免疫化学和血清学的高度特异性和敏感性与显微术的高度精确性相结合,在水产养殖病原的检测上得到一定应用胶体金免疫层析技术胶体金免疫层析技术(GICA)是一种以胶体金作为标记物应用于检测特定抗原或抗体的一种新型免疫标记技术。胶体金免疫标记技术主要利用了颗粒金具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因此可用于定性或半定量的快速免疫检测方法中该技术成为继酶标记、荧光素和放射性同位素技术之后的又一重要的现代新型免疫标记技术。GICA技术已经成为目前检测食源性传染病致病菌最快速、敏感和特异的免疫学检测方法之