第七章酶及其动力学.pptVIP

工业上酶应用的优点：酶的催化效率高，专一性强，不发生副作用。酶作用条件温和。酶及其反应产物大多无毒性。九、酶的应用第30页，共72页，星期日，2025年，2月5日酶的固定化就是把水溶性酶经物理（吸附法与包埋法）或化学方法（共价偶联法与交联法）处理后，使酶与惰性载体结合或将酶包埋起来成为一种不溶于水的状态。吸附法：使酶被吸附于惰性固体的表面，或吸附于离子交换剂上。包埋法：使酶包埋在凝胶的格子中或聚合物半透膜小胶囊中。偶联法：使酶通过共价键连接于适当的不溶于水的载体上。交联法：使酶分子依靠双功能基团试剂交联聚合成“网状”结构。第31页，共72页，星期日，2025年，2月5日102030405060min产物生成量酶反应进程曲线第32页，共72页，星期日，2025年，2月5日1、酶促反应速度反应速度单位时间内底物或产物的变化量单分子反应仅有一个底物分子参加的反应v=－dc/dt=＋dc/dt=kc双分子反应有两个底物分子参加的反应v=dc/dt=kc1c2第二节动力学有关概念第33页，共72页，星期日，2025年，2月5日2、反应级数一级反应反应速率只与底物浓度的一次方成正比的反应即单分子反应速度二级反应反应速率与底物浓度二次方或两种底物浓度积成正比的反应即双分子反应速度但有些双分子反应的级数是一级。如水解反应，水是介质，参与反应的忽略。零级反应反应速度与底物浓度的反应第34页，共72页，星期日，2025年，2月5日3、影响酶促反应速度的因素影响酶促反应速度的因素有酶浓度、底物浓度、抑制剂、激活剂、温度、pH值研究某一因素的条件同测定反应速度的条件第35页，共72页，星期日，2025年，2月5日底物浓度对酶反应速度的影响[S]vVmax一级反应v=k[S]零级反应v=k[E]第三节底物浓度对酶促反应速度的影响第36页，共72页，星期日，2025年，2月5日1、中间产物学说Henri和Hurtz提出S+EESE+P当底物浓度很低时，有多余的酶没与底物结合，随着底物浓度的增加，中间络合物的浓度不断增高。当底物浓度较高时，溶液中的酶全部与底物结合成中间产物，虽增加底物浓度也不会有更多的中间产物生成。k1k32.米氏方程式（Michaelis-Mentenequation）设km=——k2+k3k1v=——————Vmax·[S]km+[S]（km＞＞[S]，v=k[S]；km＜＜[S]，v=Vmax）k2第37页，共72页，星期日，2025年，2月5日米切尔、曼顿平衡态米氏方程推导S+EESE+Pk3设酶总浓度为［E0］，底物总浓度为［S］，游离酶浓度为［E］=［E0］－［ES］，剩余底物浓度为［S′］=［S］－［ES］=［S］v1=K1［E］［S′］=K1（［E0］－［ES］）［S］v2=K2［ES］v3=K3［ES］1913年Michaelis-Menten认为反应1、2迅速建立平衡，即K1（［E0］－［ES］）［S］=K2［ES］整理得K2K1=（［E0］－［ES］）［S］［ES］k2k1第38页，共72页，星期日，2025年，2月5日定义K2/K1为Ks，命名为中间产物解离常数即Ks=（［E0］－［ES］）［S］［ES］解出［ES］得［ES］=［E0］［S］Ks＋［S］∵反应速度v=K3［ES］∴v=K3［E0］［S］Ks＋［S］∵K3［E0］=Vmax∴v=Vmax［S］Ks＋［S］第39页，共72页，星期日，2025年，2月5日S+EESE+P伯瑞格斯、哈尔丹稳态米氏方程推导k3设酶总浓度为［E0］，底物总浓度为［S］，游离酶浓度为［E］=［E