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MALDI-TOFIMS技术：打开弥漫性轴索损伤研究新视野

一、引言

1.1研究背景与意义

弥漫性轴索损伤（DiffuseAxonalInjury，DAI）是颅脑创伤中极为常见且后果严重的原发性损伤类型，在重型颅脑损伤中，DAI占比达28％-42％，患者死亡率可高达42％-62％。其主要由外力致使颅脑产生旋转或直线加速度，进而在脑组织内部引发剪应力作用，最终导致神经轴索和小血管受损。损伤部位多集中于胼胝体、皮髓质交界区、脑干上端背侧等区域，临床上以意识障碍为典型表现。

目前，DAI的临床诊断面临诸多难题。在影像学检查方面，电子计算机断层扫描（CT）虽能快速发现与轴索损伤相关的局灶性出血，但由于其对白质纤维不显影，仅能察觉脑-灰白质交界区、胼胝体和脑干等处的出血灶，对于上述部位之外的损伤，尤其是微小损伤或针状出血，极易漏诊，多数患者的CT图像甚至无法发现损伤或出血，呈现出假阴性结果。磁共振成像（MRI）虽能准确定位非出血性DAI病灶，但对于小病灶和轻度DAI的假阴性率依然较高，且操作时间长，限制了其在危重患者中的早期应用。其他如梯度回波-磁敏感加权成像（GRE-SWI）、扩散张量成像（DTI）和扩散张量纤维束成像（DTT）等技术，也各自存在局限性，如GRE-SWI无法与高血压引起的轻微出血区分，DTI和DTT对微小神经纤维束受损显示不佳等。神经电生理学检查虽能反映脑功能改变，但也存在一定的局限性，无法全面准确地诊断DAI。因此，寻找一种更为有效的诊断方法迫在眉睫。

基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱成像（MALDI-TOFIMS）技术是一种新兴的分析技术，它能够在组织原位对生物分子进行检测和成像，可同时获取多种生物分子的信息，且无需复杂的样品前处理过程，能够较好地保留组织中生物分子的原始分布信息。将该技术应用于DAI的研究，有望突破现有诊断方法的局限，为DAI的早期诊断、病情评估及预后判断提供新的思路和方法，对提高DAI患者的救治水平具有重要的临床意义，同时也能为法医学鉴定提供更为可靠的依据，具有重要的研究价值。

1.2研究目的

本研究旨在运用MALDI-TOFIMS技术，深入探究弥漫性轴索损伤的发病机制与病理变化。具体而言，通过该技术对DAI模型动物的脑组织进行检测，寻找与DAI相关的特异性生物标志物，建立基于MALDI-TOFIMS技术的DAI诊断模型，提高DAI的早期诊断准确率；分析生物标志物在DAI发生发展过程中的变化规律，为揭示DAI的发病机制提供理论依据；探讨MALDI-TOFIMS技术在评估DAI病情严重程度和预后方面的应用价值，为临床治疗方案的制定和患者的预后判断提供有力支持。

1.3国内外研究现状

在DAI的研究方面，国外早在1956年，Strich首次描述了颅脑损伤后植物生存患者的大脑白质弥漫变性，这是DAI概念的雏形。1982年，Gennarelli等用狒狒设计出瞬间旋转模型，复制出类似人类DAI临床表现和病理特征的创伤性迁延昏迷的DAI动物模型，对明确DAI的发生机制起到了决定性作用。此后，关于DAI的研究不断深入，在发病机制、病理变化、动物模型构建等方面取得了一系列成果。在发病机制上，目前国际上普遍认为是外力致颅脑产生旋转加速度，使脑内部产生剪切力，导致神经轴索和小血管损伤。

国内对DAI的研究也在逐步开展，众多学者在DAI的临床诊断、治疗及基础研究等方面进行了探索。在临床诊断上，除了传统的CT、MRI等影像学检查外，也在尝试引入新的技术和方法，如DTI、DTT等，但这些技术仍存在一定的局限性。在治疗方面，主要以综合治疗为主，包括药物治疗、手术治疗等，但疗效仍有待提高。

在MALDI-TOFIMS技术应用于DAI研究方面，国外已有一些相关报道。有研究尝试利用该技术对DAI动物模型的脑组织进行分析，初步筛选出了一些可能与DAI相关的蛋白或多肽，但研究仍处于初步阶段，尚未建立起完善的诊断模型和生物标志物体系。国内在这方面的研究相对较少，仅有少数研究团队开展了相关探索，主要集中在利用MALDI-TOFIMS技术对DAI大鼠脑干蛋白质组学进行分析，筛选差异蛋白或多肽，为DAI的诊断和发病机制研究提供了一定的理论基础，但整体研究深度和广度还有待进一步拓展。

1.4研究方法与创新点

本研究采用实验研究与数据分析相结合的方法。在实验方面，选用合适的动物（如大鼠）构建DAI模型，通过控制外力的大小、方向和作用时间等因素，模拟人类DAI的发生过程。运用MALDI-