稻飞虱抗药性监测与褐飞虱对噻嗪酮抗性机制深度剖析.docxVIP

稻飞虱抗药性监测与褐飞虱对噻嗪酮抗性机制深度剖析

一、引言

1.1研究背景与意义

稻飞虱隶属同翅目飞虱科，是亚洲国家水稻生产中极为关键的害虫。在我国，危害水稻的飞虱主要包含灰飞虱（Laodelphaxstriatellus(Fallen)）、白背飞虱（Sogatellafurcifera(horvath)）以及褐飞虱（Nilaparvatalugens(Stal)）这三种。它们主要以刺吸植株汁液的方式危害水稻，导致水稻生长受阻，严重时甚至造成水稻大片枯死，对粮食产量与质量产生极大影响。例如，在一些稻飞虱爆发严重的年份，部分地区水稻减产可达30%-50%，极大地威胁着我国的粮食安全。

化学防治一直是防治稻飞虱的主要手段。随着杀虫剂的大量且不合理使用，稻飞虱的抗药性问题愈发严峻。这不仅使得防治成本不断攀升，防治效果也大打折扣。所以，明确灰飞虱和白背飞虱对常用杀虫剂的抗药性水平意义重大。通过抗药性监测，能够为田间科学合理用药提供关键依据，避免盲目用药导致的资源浪费和环境污染，同时有效制定抗性治理策略，延缓抗药性的发展，保障化学防治的有效性。

在过去的30年里，噻嗪酮作为防治褐飞虱的重要药剂，发挥了重要作用。但由于长期大量使用，褐飞虱对噻嗪酮已普遍产生高水平抗性。我国农业部农业技术与推广服务中心在2014年52号文件中，要求暂停使用噻嗪酮防治褐飞虱。然而，褐飞虱对噻嗪酮的抗药性机制至今尚未完全明确。深入研究这一抗性机制，不仅有助于丰富杀虫剂毒理学理论，为新型杀虫剂的研发提供理论支撑，还能为噻嗪酮的科学使用或改良提供方向，对解决褐飞虱防治难题具有重要的现实意义。

1.2国内外研究现状

国外在稻飞虱抗药性监测及抗性机制研究方面开展得较早。针对灰飞虱，部分国家已经对一些常用杀虫剂的抗药性进行了监测，发现其对部分有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂产生了不同程度的抗性。在抗性机制研究上，主要集中在解毒酶活性变化和靶标位点突变等方面。

对于白背飞虱，国外研究表明其对多种杀虫剂的抗性水平存在地域差异。在东南亚一些国家，白背飞虱对噻嗪酮和毒死蜱等药剂的抗性较高，研究揭示其抗性与表皮穿透性降低以及解毒酶活性增强有关。

关于褐飞虱对噻嗪酮的抗性机制，国外研究通过增效剂试验和酶活性分析，初步推测细胞色素P450酶系可能参与其中，但具体的分子机制仍有待深入探究。

在国内，相关研究也取得了丰硕成果。对灰飞虱的抗药性监测显示，长江中下游地区的灰飞虱对毒死蜱处于中等水平抗性，对烟碱类药剂如噻虫嗪、烯啶虫胺等较为敏感。在白背飞虱抗药性监测方面，发现部分地区的白背飞虱对毒死蜱和噻嗪酮已产生中到高水平抗性，而对新烟碱类药剂和氟啶虫胺腈等仍较敏感。在褐飞虱对噻嗪酮抗性机制的研究中，国内学者通过生物测定、增效剂分析、基因表达检测等手段，发现多功能氧化酶抑制剂PBO对噻嗪酮抗性品系和敏感品系均有增效作用，抗性品系中7个P450基因过量表达，其中CYP6ER基因差异最显著，并通过RNA干扰和基因表达系统验证了CYP6ER基因与抗性的相关性。

1.3研究目标与内容

本研究旨在全面监测灰飞虱和白背飞虱对常用杀虫剂的抗药性水平，深入探究褐飞虱对噻嗪酮的抗性生化机制，进而制定科学有效的抗性治理策略。具体研究内容如下：

灰飞虱抗药性监测：采用稻苗浸渍法，对长江中下游地区多个地点的灰飞虱田间种群进行采集，监测其对毒死蜱、吡蚜酮、噻虫嗪、烯啶虫胺、呋虫胺和氟啶虫胺腈等常用杀虫剂的抗药性水平，分析不同地区抗药性差异及变化趋势。

白背飞虱抗药性监测：运用稻茎浸渍法，收集江苏、安徽、江西、浙江和四川等省多个地区的白背飞虱田间种群，测定其对毒死蜱、噻嗪酮、吡虫啉、噻虫嗪、呋虫胺、氟啶虫胺腈和吡蚜酮等杀虫剂的抗药性，为田间防治提供数据支持。

褐飞虱对噻嗪酮抗性的生化机制研究：通过生物测定及增效剂分析，比较多功能氧化酶抑制剂PBO、酯酶抑制剂DEF和谷胱甘肽-S-转移酶抑制剂DEM对抗噻嗪酮的褐飞虱品系和敏感品系的作用，确定参与抗性的主要酶系。利用qRT-PCR技术检测细胞色素P450s家族基因在抗性品系和敏感品系中的mRNA水平，筛选出差异显著的基因。借助RNA干扰技术沉默目标基因，验证其与褐飞虱对噻嗪酮抗性的关系。运用GAL4/UAS基因表达系统驱动目标基因在果蝇中的表达，进一步明确其在抗性机制中的作用。

二、灰飞虱抗药性监测

2.1监测方法

2.1.1稻苗浸渍法

依据NY/T2622-2014《灰飞虱抗药性监测技术规程》开展稻苗浸渍法监测。首先准备感虫水稻品种，如武育粳3号，将催芽48h后的稻种均匀撒在垫有湿润滤纸的养虫盒中，置于培养箱培养，定时浇水，待稻苗长至约6cm高时