养殖环境毒害物质鉴别评估方法、养殖环境中毒害物质鉴别评估方法.pdfVIP

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附录A

（规范性或资料性）

养殖环境毒害物质鉴别评估方法

A.1养殖环境中毒害物质鉴别评估程序

养殖环境中毒害物质的鉴别评估程序包括毒性初筛、毒性表征、毒性鉴别和毒性确认，具体流程如

下。

a)、毒性初筛

采集养殖废弃物样品，进行毒性测试，判断样品是否具有毒性。若无毒性，终止实验；若具有毒性，

则进入毒性表征阶段。

b)、毒性表征

通过不同的物理、化学和生物处理手段（如沸石处理、阳离子交换树脂处理或颗粒活性炭处理）对

样品进行表征，识别主要的毒性来源。判断处理后毒性是否显著降低，若毒性降低，则进入毒性鉴别阶

段；否则，判定该类物质不是主要致毒物质。

c)、毒性鉴别

采用化学分析方法，结合毒性效应和生物有效性测定，明确毒性物质的具体成分，包括重金属和有

机污染物等。

d)、毒性确认

根据毒性鉴别结果，综合评估并确认主要的关键致毒物质信息，为后续的风险评估和污染控制提供

依据。

A.2毒性初筛

A.2.1选择研究位点

利用养殖废弃物毒性测试对废弃物进行筛查，对表现出毒性的样品进一步开展毒性鉴别评估。根据

废弃物污染特征，选择合适的模式生物（如蚯蚓或微生物）及毒性终点。参考EPA指南，可选择蚯蚓

为模式生物，进行14天毒性实验，以生长抑制率或死亡率作为毒性终点。

A.2.2具体步骤

A.2.2.1样品预处理

a)、将养殖废弃物样品进行充分混匀，按一定比例分装到培养容器中；

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b)、每个容器中加入60g湿废弃物样品，并混入250mL中性土壤作为介质；

c)、样品混合后，静置过夜，用于毒性测试。

A.2.2.2毒性测试

a)、在恒温培养箱中开展实验，温度控制在20℃±1℃，湿度保持在60%～80%；

b)、向每个容器中加入模式生物（如10只蚯蚓或微生物菌群）；

c)、实验周期为14天，期间定期监测生物的存活情况、体重变化及行为反应；

d)、实验开始和结束时分别采集样品，检测关键污染物（如氨氮、重金属）的含量，以及水分、pH、

溶解氧等参数。

A.2.2.3数据记录与分析

a)、记录模式生物的死亡数量、生长抑制率或其他毒性反应指标；

b)、根据结果判断样品是否具有毒性。无毒性的样品实验结束，有毒性的样品进入毒性表征阶段。

A.3毒性表征

A.3.1方法概述

参考EPA/600/R–07/080，通过添加不同处理剂改变废弃物中某类污染物的毒性，从而推断引起毒

性的主要污染物类别。重点关注的污染物包括抗生素、激素、农药、消毒副产物、重金属等，其处理方

式分别为加入活性炭、阳离子交换树脂和沸石等材料。对处理前后的样品进行生物毒性测试，通过对比

毒性变化，确定致毒物类别。

A.3.2实验材料预处理

A.3.2.1活性炭预处理

a)、粉碎：将椰壳活性炭粉碎至80目～325目；

b)、清洗：用纯水超声清洗3次，去除杂质；

c)、脱气：用真空泵脱气处理，避光保存于4℃。

A.3.2.2阳离子交换树脂预处理

a)、风干：将树脂风干24小时；

b)、清洗：依次使用乙醇溶液、盐酸溶液及纯水超声清洗，调整pH值至7～8；

c)、储存：将处理后的树脂置于4℃避光保存，使用前用纯水激活。

A.3.2.3沸石预处理

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