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主要内容;
;1.病源微生物八大类;;
2.原核细胞型微生物;
3.真核细胞型微生物
;二、微生物对重金属活性的影响;
吸附机理
;革兰氏染色类型;
;;;
两大主要因素:pH、温度;李清彪,吴涓,杨宏泉,等.白腐真菌菌丝球形成的物化条件及其对铅的吸附[J].环境科学,1999,20(1):34239·
;;
如康春莉等发现在温度低于30℃时,温度对
Pb2+、Cd2+的吸附没有影响;当温度高30℃
时,吸附量略有下降,这肯能是因为温度过高
影响了胞外络合物的活性导致的。
;;第十八页,共四十二页。;;
;;
重金属可与土壤中的有机配位体发生配合作用,影响
着土壤中重金属离子的迁移活性。
----腐殖质中的富里酸与重金属离子形成的螯合物,溶解
度较大,易于在土壤中迁移。
----腐殖质中的腐殖酸与重金属形成的螯合物溶解度小,
不易在土壤中迁移。
;
pH值↑→重金属离子的溶解度↓→迁移能力↓
土壤的氧化还原状况影响重金属的存在形态,使其溶解
度发生变化,从而影响重金属在土壤中的迁移。
;
微生物通过三种方式影响重金属的迁移转化:
1.主动与被动的堆积、在其体内富集;
2.通过微生物的金属转化作用使重金属的形态发生转化;
3.通过影响重金属的活性,实现不同金属离子间的形态转化。
;如有些微生物可把难溶性的Pu4+还原成可溶性的Pu3+,把
Hg2+还原成挥发性的Hg,铁锰氧化物的还原也可把吸附在难
溶性Fe3+、Mn4+氧化物上的重金属释放出来。
;
菌根是土壤中的真菌菌丝与高等植物营养根系形成的一种联
合体,具有很强的酸溶和酶解能力,菌根根际分泌物及根际提供的
微生态使菌根根际维持较高的微生物种群密度和生理活性,从而促
进植物生长。
;1)菌根真菌通过分泌特殊的分泌物等形式改变植物根际环境,改变重金属的存在状态,降低重金属毒性;;3)菌根真菌向宿主植物传递营养,使植物幼苗成活率提
高,宿主植物抗逆性增强、生长加快,间接地促进植物对重
金属的修复作用。
菌根的形成也同时影响植物根际微生物的种类和数量。
;值得注意???是:
一般认为,重金属污染土壤中的土著菌根真菌耐
受重金属能力较强,植物与菌根真菌生物修复的关
键在于筛选有较强降解能力的菌根真菌和适宜的共
生植物,使两者能相互匹配形成有效的菌根。
;
三、重金属胁迫下对微生物多样性的影响
植物根系在重金属的胁迫下,可导致分泌物的大量释放
可溶性分泌物,如有机酸、氨基酸、单糖等,可通过螫合作用和还原作用,或通过改变根系区域的pH值和氧化还原状况,增加重金属的溶解性和移动性;
不溶性分泌物,如多糖、挥发性化合物,脱落的细胞组织等则在抵御重金属的毒害作用中起着重要的作用。;1.重金属污染对微生物群落多样性的影响
微生物可以影响重金属的活性,同样重金属在短时期内可
以降低微生物的活性,污染严重时还会降低微生物的生物数
量。如图所示分析模型1和模型2:
;;
16SrDNA-DGGE技术基本路线
一样品总DNA的提取:
1实验器材:玻璃器材,铝盖,1.5mL离心管,螺口管,锆珠,搅拌器,4℃离心机。
实验试剂:PBS(0.05M,pH=7),水饱和酚,TE饱和酚,TN150,TE缓冲液,TAE缓冲液,NaAc(pH=5.2),氯仿/异戊醇(24:1)(V/V),96%冷乙醇,70%冷乙醇。
3实验操作:细胞分裂、提取DNA;二、DNA的检测—琼脂糖凝胶电泳
1试剂和器材:电泳缓冲液(1*TAE),溴乙锭(EB)染色
贮存液(1mg/mL),0.25%溴酚兰,琼脂糖,双蒸水。电泳
仪,水平电泳槽,透射紫外灯,胶带纸。
2.实验操作:1.2%琼脂糖凝胶的制备、点样、电泳、观察;三、16srDNA片段扩增
1细菌通用引物:
EUB-968Gcfor:5′CGCCCGGGGCGCGCCCCGGGCGGGGCGGGG
GCACGGGGGGAACGCGAAGAACCTTAC3′
EUB-L1401rev:5′CGGTGTGTACAAGACCC3′
2反应体系:反应液组成:单个样品量、MQ、dNTP、MgCl2、PCR缓冲液、引物968Gcfor、引物L1401rev、TaqDNA聚合酶、样品DNA;3、反应条件:
;四变性梯度凝胶电泳(DGGE)
1实验试剂及配量:100%的贮存液、0%的贮存液、缓冲液、固定液、银染溶液、显影剂
2实验操作:玻璃三明治的制备、
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