微生物与重金属之间的相互关系.pptVIP

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主要内容;

;1.病源微生物八大类;;

2.原核细胞型微生物;

3.真核细胞型微生物

;二、微生物对重金属活性的影响;

吸附机理

;革兰氏染色类型;

;;;

两大主要因素:pH、温度;李清彪,吴涓,杨宏泉,等.白腐真菌菌丝球形成的物化条件及其对铅的吸附[J].环境科学,1999,20(1):34239·

;;

如康春莉等发现在温度低于30℃时,温度对

Pb2+、Cd2+的吸附没有影响;当温度高30℃

时,吸附量略有下降,这肯能是因为温度过高

影响了胞外络合物的活性导致的。

;;第十八页,共四十二页。;;

;;

重金属可与土壤中的有机配位体发生配合作用,影响

着土壤中重金属离子的迁移活性。

----腐殖质中的富里酸与重金属离子形成的螯合物,溶解

度较大,易于在土壤中迁移。

----腐殖质中的腐殖酸与重金属形成的螯合物溶解度小,

不易在土壤中迁移。

;

pH值↑→重金属离子的溶解度↓→迁移能力↓

土壤的氧化还原状况影响重金属的存在形态,使其溶解

度发生变化,从而影响重金属在土壤中的迁移。

;

微生物通过三种方式影响重金属的迁移转化:

1.主动与被动的堆积、在其体内富集;

2.通过微生物的金属转化作用使重金属的形态发生转化;

3.通过影响重金属的活性,实现不同金属离子间的形态转化。

;如有些微生物可把难溶性的Pu4+还原成可溶性的Pu3+,把

Hg2+还原成挥发性的Hg,铁锰氧化物的还原也可把吸附在难

溶性Fe3+、Mn4+氧化物上的重金属释放出来。

;

菌根是土壤中的真菌菌丝与高等植物营养根系形成的一种联

合体,具有很强的酸溶和酶解能力,菌根根际分泌物及根际提供的

微生态使菌根根际维持较高的微生物种群密度和生理活性,从而促

进植物生长。

;1)菌根真菌通过分泌特殊的分泌物等形式改变植物根际环境,改变重金属的存在状态,降低重金属毒性;;3)菌根真菌向宿主植物传递营养,使植物幼苗成活率提

高,宿主植物抗逆性增强、生长加快,间接地促进植物对重

金属的修复作用。

菌根的形成也同时影响植物根际微生物的种类和数量。

;值得注意???是:

一般认为,重金属污染土壤中的土著菌根真菌耐

受重金属能力较强,植物与菌根真菌生物修复的关

键在于筛选有较强降解能力的菌根真菌和适宜的共

生植物,使两者能相互匹配形成有效的菌根。

;

三、重金属胁迫下对微生物多样性的影响

植物根系在重金属的胁迫下,可导致分泌物的大量释放

可溶性分泌物,如有机酸、氨基酸、单糖等,可通过螫合作用和还原作用,或通过改变根系区域的pH值和氧化还原状况,增加重金属的溶解性和移动性;

不溶性分泌物,如多糖、挥发性化合物,脱落的细胞组织等则在抵御重金属的毒害作用中起着重要的作用。;1.重金属污染对微生物群落多样性的影响

微生物可以影响重金属的活性,同样重金属在短时期内可

以降低微生物的活性,污染严重时还会降低微生物的生物数

量。如图所示分析模型1和模型2:

;;

16SrDNA-DGGE技术基本路线

一样品总DNA的提取:

1实验器材:玻璃器材,铝盖,1.5mL离心管,螺口管,锆珠,搅拌器,4℃离心机。

实验试剂:PBS(0.05M,pH=7),水饱和酚,TE饱和酚,TN150,TE缓冲液,TAE缓冲液,NaAc(pH=5.2),氯仿/异戊醇(24:1)(V/V),96%冷乙醇,70%冷乙醇。

3实验操作:细胞分裂、提取DNA;二、DNA的检测—琼脂糖凝胶电泳

1试剂和器材:电泳缓冲液(1*TAE),溴乙锭(EB)染色

贮存液(1mg/mL),0.25%溴酚兰,琼脂糖,双蒸水。电泳

仪,水平电泳槽,透射紫外灯,胶带纸。

2.实验操作:1.2%琼脂糖凝胶的制备、点样、电泳、观察;三、16srDNA片段扩增

1细菌通用引物:

EUB-968Gcfor:5′CGCCCGGGGCGCGCCCCGGGCGGGGCGGGG

GCACGGGGGGAACGCGAAGAACCTTAC3′

EUB-L1401rev:5′CGGTGTGTACAAGACCC3′

2反应体系:反应液组成:单个样品量、MQ、dNTP、MgCl2、PCR缓冲液、引物968Gcfor、引物L1401rev、TaqDNA聚合酶、样品DNA;3、反应条件:

;四变性梯度凝胶电泳(DGGE)

1实验试剂及配量:100%的贮存液、0%的贮存液、缓冲液、固定液、银染溶液、显影剂

2实验操作:玻璃三明治的制备、

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