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核酸(nucleicacid);二、核酸的分类及分布;第一节
核酸的化学组成及一级结构
TheChemicalComponentandPrimaryStructureofNucleicAcid;一、核酸的化学组成;嘌呤(purine);;Pentose;Nucleoside;Nucleotide;现在是10页\一共有55页\编辑于星期六;二、核酸的一级结构;A;第二节
DNA的空间结构与功能DimensionalStructureandFunctionofDNA;一、DNA的二级结构
——双螺旋结构;WATSON
;(一)DNA双螺旋结构的研究背景;(二)DNA双螺旋结构模型要点
(Watson,Crick,1953);碱基垂直螺旋轴居双螺旋内側,与对側碱基形成氢键配对(互补配对形式:A=T;G?C)。
相邻碱基平面距离0.34nm,螺旋一圈螺距3.54nm,一圈10.5对碱基。;氢键维持双链横向稳定性,碱基堆积力维持双链纵向稳定性。;(三)DNA双螺旋结构的多样性;二、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装;现在是22页\一共有55页\编辑于星期六;(二)原核生物DNA的高级结构;(三)DNA在真核生物细胞核内的组装;现在是25页\一共有55页\编辑于星期六;三、DNA的功能;第三节
RNA的结构与功能;RNA的种类、分布、功能;一、信使RNA的结构与功能;*mRNA结构特点;帽子结构;mRNA核内向胞质的转位
mRNA的稳定性维系
翻译起始的调控;;*tRNA的一级结构特点
核苷酸残基数在60-90之间;
含10~20%稀有碱基,如DHU
3′末端为—CCA-OH
5′末端大多数为pG;稀有碱基;*tRNA的二级结构
——三叶草形;;现在是38页\一共有55页\编辑于星期六;*rRNA的结构;*rRNA的种类(根据沉降系数);四、其他非编码RNA;核酸的理化性质
ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid;一.核酸的紫外吸收;1.DNA或RNA的定量
OD260=1.0相当于
50μg/ml双链DNA
40μg/ml单链DNA(或RNA)
20μg/ml寡核苷酸
2.判断核酸样品的纯度
DNA纯品:OD260/OD280=1.8
RNA纯品:OD260/OD280=2.0;二、DNA的变性(denaturation);;例:变性引起紫外吸收值的改变;Tm:紫外光吸收值达到最大变化值的50%时的温度称为DNA的解链温度,又称融解温度(Tm)。其大小与G+C含量成正比。;三、DNA的复性与分子杂交;在DNA变性后的复性过程中,将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜???条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。;DNA-DNA
杂交双链分子;现在是52页\一共有55页\编辑于星期六;核酸分子杂交的应用
研究DNA分子中某一种基因的位置
测定两种核酸分子间的序列相似性
检测某些专一序列在待检样品中存在与否
是基因芯片技术的基础;第五节
核酸酶
Nuclease;谢谢大家!
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