微生物的分离和计数.pptVIP

课题1我们学习了培养基的配制以及微生物的培养（接种技术）。下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物，并对目的微生物进行培养计数。;一、研究思路;测定微生物数量的方法：

1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数。

先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。

优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。

缺点：不能区分死菌和活菌；

难以计数微小的细菌。

一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。

;2、间接计数法：最常用稀释涂布平板计数法

应用：统计样品中活菌的数目

;操作：设置重复组，增强实验的说服力和准确性。将待测样品经过一系列的稀释，然后选择三个稀释度的菌液均匀涂布在平板上，然后培养。

（注意）：为了结果接近真实值，可将同一稀释度菌液涂布到3个或3个以上的平板上，经培养，计算出菌落的平均数。

对照原则：判断培养基中是否有杂菌污染，将未接种的培养基同时进行培养。

判断选择培养基是否具有筛选作用，对照培养基接种后培养观察菌落数目。

计算公式：每克样品中的菌株数=（C/V）*M;（1）原理：尿素是一种重要的农业氮肥，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。尿素细菌能合成脲酶，在脲酶的作用下尿素被分解成氨。

CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3

;（2）实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。

（3）实验流程：

土壤取样

样品系列稀释

涂布平板与培养

观察并记录结果;

;三、结果分析与评价;四、课堂总结、点评;五、课余作业;练一练

用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（）

A.比实际值高

B.比实际值低

C.和实际值一致

D.比实际值可能高也可能低;有些细菌含有尿素分解酶，能将尿素琼脂培养基中的尿素分解生成氨，氨溶于水变成氢氧化铵，导致培养基变成碱性，使酚红指示剂呈现红色。

下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()

A.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水

C.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、水

D.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水