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聚乳酸/聚己二酸-对苯二甲酸丁二酯降解菌的筛选、鉴定与降解机制解析

一、引言

1.1研究背景与意义

随着全球工业化和城市化进程的加速，塑料的使用量急剧增加。据统计，自20世纪50年代以来，全球已生产超过100亿吨塑料，其中约60%最终成为垃圾，进入自然环境。这些传统塑料由于其化学结构稳定，难以在自然环境中降解，导致了严重的塑料污染问题。塑料污染广泛分布于大气、土壤、海洋等各个环境介质中，对生态系统和人类健康构成了严重威胁。每年约有1000万吨塑料流入海洋，形成了如“大太平洋垃圾带”这样的巨型垃圾堆积场，海洋生物因误食塑料或被塑料缠绕而死亡的现象屡见不鲜。在土壤中，塑料残膜需要200年以上才能降解，这不仅影响了土壤的透气性和透水性，导致农作物减产，还会污染地下水资源。

为了解决塑料污染问题，可降解塑料应运而生。聚乳酸（PLA）和聚己二酸-对苯二甲酸丁二酯（PBAT）是两种重要的可降解塑料。PLA是一种生物可降解的热塑性聚酯，来源于可再生的植物资源，如玉米淀粉、木薯等，具有良好的透明度、光泽度和加工性能。PBAT是一种脂肪族-芳香族共聚酯，具有良好的柔韧性、拉伸性和热稳定性，在土壤、海水和堆肥等多种环境下都能被微生物分解。将PLA和PBAT共混，可以综合两者的优点，得到性能更优异的可降解材料，广泛应用于包装、农业地膜、生物医用材料等领域。

然而，PLA/PBAT共混材料的降解速度相对较慢，在实际应用中仍可能存在一定的环境风险。微生物降解是可降解塑料降解的重要途径之一，分离筛选能够高效降解PLA/PBAT的微生物，并深入研究其降解机制，对于加速可降解塑料的降解、减少塑料污染具有重要的现实意义。通过本研究，可以为PLA/PBAT共混材料的降解提供新的技术手段和理论依据，推动可降解塑料的广泛应用，促进环境保护和可持续发展。

1.2国内外研究现状

在聚乳酸降解菌的分离筛选方面，国内外学者已取得了一定的成果。有研究从土壤、堆肥等环境中分离出了多种具有聚乳酸降解能力的微生物，如芽孢杆菌属、曲霉属等。通过优化培养条件，这些菌株对聚乳酸的降解率得到了显著提高。在降解机制方面，研究发现聚乳酸降解菌主要通过分泌酯酶等酶类，将聚乳酸分子链切断，从而实现降解。

对于聚己二酸-对苯二甲酸丁二酯降解菌的研究，也有不少报道。从海洋、土壤等环境中分离出了能够降解PBAT的微生物，如假单胞菌属、链霉菌属等。在降解过程中，微生物分泌的脂肪酶等酶类起到了关键作用，它们能够特异性地作用于PBAT的酯键，使其分解。

在PLA/PBAT共混材料降解菌的研究领域，目前的研究相对较少。部分研究尝试从富含可降解塑料的环境中分离筛选能够同时降解PLA和PBAT的微生物，但所获得的菌株降解效率还有待进一步提高。对于共混材料的降解机制，尚未形成系统的认识，仍需要深入研究不同微生物及其分泌的酶对PLA/PBAT共混体系的协同作用机制。

1.3研究内容与创新点

本研究的主要内容包括：从不同环境样本中分离筛选能够高效降解聚乳酸/聚己二酸-对苯二甲酸丁二酯（PLA/PBAT）的微生物菌株；对筛选得到的降解菌进行鉴定和特性分析，研究其生长特性、降解特性以及对不同环境因素的耐受性；深入解析降解菌对PLA/PBAT的降解机制，包括酶学机制、代谢途径等。

本研究的创新点在于：首次系统地从多种复杂环境中分离筛选PLA/PBAT共混材料的降解菌，扩大了筛选范围，提高了获得高效降解菌的可能性；综合运用多种现代生物技术手段，如基因组学、蛋白质组学等，深入研究降解菌的降解机制，有望揭示新的降解途径和关键酶，为可降解塑料的生物降解提供更深入的理论基础；将分离筛选得到的降解菌应用于实际环境中的PLA/PBAT降解，评估其实际应用效果，为解决塑料污染问题提供切实可行的解决方案。

二、材料与方法

2.1实验材料

2.1.1样品采集

为了确保采集的样品具有代表性，能够分离出高效降解聚乳酸/聚己二酸-对苯二甲酸丁二酯（PLA/PBAT）的微生物，本研究在不同环境下进行了样品采集。分别从长期堆放可降解塑料制品的垃圾填埋场、使用可降解地膜的农田以及富含微生物的森林土壤等地点采集土壤样品。在垃圾填埋场，选取了塑料堆积时间较长、环境较为潮湿且温度适宜微生物生长的区域，用无菌铲子采集深度为5-15厘米的土壤，装入无菌密封袋中。在农田中，选择连续多年使用PLA/PBAT地膜的地块，随机选取5个采样点，每个采样点采集约100克土壤，混合均匀后作为一个样品。森林土壤则采集自树木根系周围，同样确保采样深度和环境的一致性。

除了土壤样品，还采集了城市污水处理厂的活性污泥和堆肥厂的堆肥