2025年淋巴细胞亚群测定.pdfVIP

百学须先立志。——朱熹

淋巴细胞亚群测定

方法

流式细胞仪(BeckmanCoulter，贝克曼库尔特)

原理：

双/三色/四色直接免疫荧光法。荧光素标记的各种单克隆抗体加入到全血中，

与白细胞膜上相应的抗原结合，经过溶血、洗涤（和固定）等步骤后，在流式

细胞仪上进行分析，从而得到淋巴细胞亚群的百分数，加入Flow-Count即可

得出绝对计数。淋巴细胞表面抗原分布如下：T淋巴细胞：CD3+；B淋巴细胞：

CD3-，CDl9+；辅助性T淋巴细胞：CD3+CD4+；抑制性T淋巴细胞：CD3+CD8+；

NK细胞：CD3-CDl6+56+等。根据淋巴细胞膜上CD分子表达的不同，流式细胞

仪可以分辨出淋巴细胞及其各种不同的亚群，利用计算机软件计算出淋巴细胞

亚群的百分数，加入Flow-Count组会自动得出绝对计数。

标本采集与处理

受检者的准备检查对象生活饮食处于日常状态。

采集部位静脉采血

抗凝剂EDTA或肝素抗凝血

要求1．样本量1ml。

2．样本应在采集后6小时内处理，冷冻或溶血的标本不能用。

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3．样本白细胞计数应在4.0-10.0×10/L之间。若10.0×10/L，

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样本需要稀释，用PBS稀释；若4.0×10/L，应分离单个核

细胞。

试剂

品牌剂型规格贮存

贝克曼库尔特

成分1：单克隆抗体液体2—8℃

(CD45/4/8/3No.6607013CD45/56/19/3No.6607073

CD4/8/3No.IM1650同型对照IgG1/IgG1/IgG1No.IM1672

CD3/19No.IM1293CD3/16+56No.IM2076CD19-PC5No.IM2643

Flow-Count荧光微球No.7547053)

2：全血溶血试剂(Q-Prep)液体(No.7546946)

A：甲酸液体70ML室温

B：碳酸钠等液体32ML室温

C：多聚甲醛液体14ML室温

(OptilyseCNo.IM1401)液体室温

3：鞘液(No.8546859)液体20L室温

4：清洗液(No.8546930)液体5L室温

5：荧光微球(No.6605359)液体10ML2-8℃(Flow-Chec