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无菌检查

一、无菌检查

无菌性检查

环境保证培养基保证

灵敏度检查

SOP操作有效的方法方法确认

有效的结果

结果判断

可靠的结论

二、检测标准

《中华人民共和国药典》2015版四部1101无菌检查

法

GB/T14233.2-2005医用输液、输血、注射器具检验方

法第2部分：生物学试验方法

ISO11737-22009医疗设备的灭菌－微生物学方法第

二部分：灭菌过程中无菌测试的定义，验证及维护

三、检测环境

GB/T14233.2-2005：单向流空气、工作台面及环境应定

期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、

无菌室操作台或超净工浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国

作台局部应符合洁净度家标准进行洁净度确认。隔离系统应

100级单向流空气区域定期按相关的要求进行验证，其内部

环境的洁净度须符合无菌检查的要求。

要求。

2015版药典要求

1101无菌检查：无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达

到无菌检查的要求。

9203药品微生物实验室质量管理指导原则：无菌检査应在B级背

景下的A级单向流洁净区域或隔离系统中进行，

四、菌种的选择

菌株名称及编号菌种分类无菌检查适用性培养基查适用性

金黄色葡萄球菌

革兰氏阳性菌✔✔

CMCC(B)26003

大肠埃希菌CMCC(B)44102革兰氏阴性菌、对抑菌性敏感✔×

革兰氏阴性菌、对营养物质要

✔

铜绿假单胞菌CMCC(B)10104求高×

生孢梭菌CMCC(B)64941厌氧菌✔✔

枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501芽孢杆菌✔✔

白色念珠菌CMCC(F)98001酵母菌✔✔

黑曲霉CMCC(F)98003霉菌✔✔

注：菌株传代次数不得超过5次。

五、实验材料准备

1、实验所需的培养基及稀释液（2015版药典）

①胰酪大豆胨液体培养基——用于真菌和需氧菌的培养

②流乙醇酸盐流体培养基——用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌培养。

③胰酪大豆胨琼脂培养基——用于细菌的计数

④沙氏葡萄糖琼脂培养基——用于霉菌的计数

五、实验材料准备

2、培养基配制

①直接购买配制好的干粉培养基，按照培养基包装上的说明，取规定量的

干粉培养基及纯化水进行配制，按121℃，15min进行灭菌，灭菌后冷却至

室温备用。

②药典规定：配制好的培养基应保存在2~25℃，非密闭容器，一般三周以

内使用。

五、实验材料准备

3、培养基适用性检查

①无菌性检查——排出培