陆地棉细胞质雄性不育系J-4A育性恢复基因的遗传剖析与分子标记定位研究.docxVIP

陆地棉细胞质雄性不育系J-4A育性恢复基因的遗传剖析与分子标记定位研究

一、引言

1.1研究背景与意义

棉花作为重要的经济作物，是全球可再生天然纺织纤维的关键来源，也是重要的植物油资源，在农业经济中占据重要地位，全世界约95%的棉花产量源自陆地棉。杂种优势利用是提升棉花产量、改良纤维品质的关键手段，通过将高产、优质和抗逆等优良性状聚合，能更好地满足棉花生产与棉纤维纺织工业的需求。

当前，棉花杂种优势利用主要采用人工去雄授粉法和核不育系“一系两用”法，但这些方法存在操作繁琐、制种成本高的问题，限制了大规模推广应用。而细胞质雄性不育“三系”（不育系、保持系、恢复系）配套利用杂种优势的方式，操作简便且制种成本低，是棉花杂种优势利用的重要发展方向。然而，棉花细胞质雄性不育系存在恢复源狭窄及不育胞质对杂种一代皮棉产量产生负效应的问题，导致“三系”杂种棉选育进展缓慢。因此，深入研究棉花细胞质雄性不育系及育性恢复基因，对拓宽恢复源、提高杂种棉产量具有重要意义。

陆地棉细胞质雄性不育系J-4A是具有重要研究价值的材料，对其育性恢复基因的研究，有助于揭示棉花细胞质雄性不育育性恢复的遗传机制，为培育强恢复系提供理论依据。通过开发与育性恢复基因紧密连锁的分子标记，可实现分子标记辅助选择育种，提高育种效率，加速“三系”杂种棉的选育进程，对棉花产业的发展具有重要的推动作用。

1.2国内外研究现状

国内外学者在陆地棉细胞质雄性不育系及育性恢复基因方面开展了大量研究。在细胞学研究方面，发现棉花胞质不育系花药绒毡层的过早退化或推迟解体与造孢细胞和花粉母细胞的败育密切相关，小孢子败育时期主要集中在造孢细胞增殖时期、减数分裂时期或贯穿这两个时期。在生理生化研究方面，对碳水化合物、氨基酸、酶、激素和活性氧代谢等指标的研究表明，棉花细胞质雄性不育与这些生理生化过程的异常密切相关。例如，不育花药中淀粉和可溶性糖含量低，氨基酸含量异常导致蛋白质合成受阻，过氧化物酶同工酶和细胞色素氧化酶同工酶存在差异，内源激素含量在可育花药与不育花药间差异显著，活性氧代谢失衡等。

在分子生物学研究方面，明确了棉花细胞质雄性不育受特定的细胞质基因和核内不育基因共同控制，线粒体基因组的重排、突变及线粒体基因的剪切、编辑都可能引起细胞质雄性不育。对育性恢复基因的研究表明，恢复基因主要分为核基因和质体基因，核基因编码的蛋白质可与质体基因相互作用恢复质体功能因子的表达和功能，质体基因则通过控制质体基因的转录和翻译等机制恢复育性。此外，国内外学者还通过遗传分析和定位，对一些棉花育性恢复基因进行了研究，但对于陆地棉细胞质雄性不育系J-4A育性恢复基因的研究还相对较少，存在研究空白。

1.3研究目标与内容

本研究旨在明确陆地棉细胞质雄性不育系J-4A育性恢复基因的遗传规律，并开发与其紧密连锁的分子标记。具体研究内容包括：

利用J-4A与恢复系构建遗传群体，通过田间育性调查，分析育性恢复的遗传规律，确定育性恢复基因的数目、显隐性关系等。

采用分子标记技术，如SSR、SNP等，对遗传群体进行分析，筛选与J-4A育性恢复基因紧密连锁的分子标记。

对筛选到的分子标记进行验证和定位，确定其在染色体上的位置，为分子标记辅助选择育种提供可靠的标记。

二、材料与方法

2.1试验材料

本研究选用陆地棉细胞质雄性不育系J-4A作为母本，其表现为雄性不育，花药干瘪、无花粉或花粉败育，雌蕊发育正常，能够接受外来花粉完成受精过程。恢复系选用具有强恢复能力的材料R，该恢复系与J-4A杂交后，杂种一代能够恢复育性，花粉活力高，结实正常。以J-4A与R杂交获得F1代，F1代自交得到F2代，同时F1代与J-4A回交获得BC1代，构建遗传群体。这些群体材料用于后续的育性调查和遗传分析，以明确育性恢复基因的遗传规律。

2.2田间试验设计

试验在[试验地点]进行，该地区气候条件适宜棉花生长，土壤肥力均匀。采用随机区组设计，设置3次重复。将J-4A、R、F1、F2和BC1代材料分别种植在不同小区，每个小区种植[X]株，株行距为[具体株行距]，保证植株有足够的生长空间。

在棉花开花期，进行人工杂交授粉。选择J-4A的花蕾，在开花前一天去雄，然后用恢复系R的花粉进行授粉，套袋标记，以获得F1代种子。F1代自交和回交操作同理，确保杂交过程的准确性和可靠性。

在整个生育期，对棉花进行常规田间管理，包括适时浇水、施肥、病虫害防治等，保证棉花正常生长发育。定期记录棉花的生长情况，包括株高、叶数、现蕾期、开花期等，为后续的育性调查和分析提供基础数据。

2.3育性调查方法

在棉花盛花期，对各世代群体的植株进行育性调查。调