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马铃薯体细胞杂种主要农艺性状及倍性研究

一、引言

（一）研究背景与意义

马铃薯（SolanumtuberosumL.）作为全球第四大重要的粮食作物，在保障粮食安全、促进农业经济发展和满足人们多样化饮食需求等方面发挥着举足轻重的作用。随着人口增长和环境变化，对马铃薯产量、品质和抗逆性等方面提出了更高要求。然而，马铃薯常规杂交育种面临诸多挑战，其中倍性差异和远缘杂交不亲和障碍成为限制其种质创新和品种改良的关键瓶颈。

马铃薯野生种和原始栽培种资源丰富，已鉴定出8个原始栽培种和228个野生种。这些野生资源携带对病害、虫害、干旱、病毒病等广泛的抗性基因，如野生种S.brevidens几乎高抗或免疫马铃薯X病毒（PVX）、Y病毒（PVY）、马铃薯卷叶病毒（PLRV），并具有耐霜冻等优良基因；野生种S.chacoense、S.microdontum、S.stenotomum和原始栽培种S.phureja具有细菌性青枯病的抗性基因。但马铃薯野生种和原始栽培种大多为二倍体，普通栽培种为四倍体，两者间存在倍性水平和胚乳平衡数（EndospermBalanceNumber，EBN）的差异，直接杂交困难重重，极大限制了野生资源中优良基因在栽培品种改良中的应用。

体细胞杂交技术的兴起为突破上述瓶颈带来了曙光。该技术通过将有性杂交困难的亲本进行原生质体融合，使野生资源中的优良基因得以转移到栽培品种中。这不仅在一定程度上克服了有性杂交不亲和的障碍，扩大了马铃薯种质范围，还能实现线粒体和叶绿体等胞质基因控制的性状转移和重组。通过体细胞杂交创制的马铃薯体细胞杂种，整合了双亲的遗传物质，理论上具备双亲的优良性状，在马铃薯农艺性状改良和新种质创制中展现出巨大潜力。

开展马铃薯体细胞杂种的主要农艺性状及倍性研究，具有重要的理论与实践意义。在理论层面，深入了解体细胞杂种农艺性状的遗传规律和表现特征，有助于揭示杂种优势形成的分子机制，丰富植物遗传学理论；明确倍性对杂种生长发育、育性及性状表达的影响，为多倍体植物遗传育种研究提供重要参考。实践中，准确解析农艺性状表现和倍性特征，能为杂种材料的筛选、评价和利用提供科学依据，加速马铃薯新品种选育进程，推动马铃薯产业可持续发展。

（二）研究目标与内容

本研究旨在全面解析马铃薯体细胞杂种的主要农艺性状及倍性特征，为其在马铃薯育种中的有效利用奠定基础。具体研究目标包括：深入剖析马铃薯体细胞杂种主要农艺性状的表现规律，明确不同杂种株系间农艺性状的差异及变异范围；精准测定体细胞杂种的倍性，阐明其倍性分布特征及影响因素；深入探究倍性与农艺性状之间的内在关联，揭示倍性对农艺性状表达的调控机制。

围绕上述目标，研究内容主要涵盖以下几个方面：选用适宜的马铃薯亲本材料，通过体细胞杂交技术获得杂种株系，并对表现出显著性状的杂种进行详细观察与记录；在不同生境条件下，系统开展所选杂种的生长调查，全面分析其形态特征（如株型、叶形、茎色等）、生化性状（如淀粉含量、蛋白质含量等）；运用先进的细胞学技术，对所选杂种进行染色体数目的统计和倍性分析，确定其倍性组成；借助遗传学分析手段，对获得的大量数据进行深入挖掘，探讨马铃薯体细胞杂种主要性状的遗传规律，明确各性状的遗传方式和遗传力。

二、材料与方法

（一）试验材料

亲本选择：本研究精心挑选了四倍体栽培种‘中薯二号’作为栽培种代表。‘中薯二号’是广泛种植的优良品种，具有适应性广、结薯集中、薯块大且整齐等特点，在马铃薯生产中占据重要地位，为杂种提供良好的农艺性状基础。二倍体野生种选用S.chacoense，它携带对多种病害如细菌性青枯病的抗性基因，以及适应恶劣环境的基因，是改良栽培种抗性和拓宽遗传背景的优质野生资源。

体细胞杂种创制：采用PEG介导原生质体融合技术来获得马铃薯体细胞杂种。从‘中薯二号’和S.chacoense的无菌试管苗叶片中分离原生质体，在PEG溶液（浓度一般为30%-50%，本研究选用40%）、钙离子（Ca2?浓度约10-50mmol/L）和一定pH值（通常pH7.0-7.5）的融合液作用下，促使双亲原生质体紧密接触并融合。融合后的原生质体经液体浅层培养，形成愈伤组织。将愈伤组织转移至含有不同浓度植物激素（如生长素NAA0.1-1.0mg/L、细胞分裂素6-BA1.0-3.0mg/L）的分化培养基上，诱导不定芽再生。对再生植株进行生根培养，获得完整的体细胞杂种株系，如3c3-6、8c30-1等，并建立起包含多个杂种株系的杂种群体，用于后续研究。

（二）研究方法

农艺性状观测

形态学指标：在马铃薯的整个生育期，对株型进行细致观察，区分其为直立型、半直立型或匍匐型；用卷尺测