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低温胁迫下草菇抗氧化应答中关键酶的表达与活性变化研究

一、引言

1.1研究背景

草菇（Volvariellavolvacea），又名兰花菇、中国菇，在植物分类学上属于真菌门、担子菌纲、伞菌目、鹅膏菌科、草菇属，是一种重要的热带亚热带菇类，也是世界上第三大栽培食用菌。我国草菇产量居世界之首，主要分布于华南地区。草菇不仅气味清香、味道鲜美，还具有极高的营养价值，每100g鲜菇含207.7mg维生素C、2.6g糖分、2.68g粗蛋白、2.24g脂肪以及0.91g灰分。其蛋白质中含18种氨基酸，其中必需氨基酸占比达40.47-44.47％，此外，还富含磷、钾、钙等多种矿质元素。除了食用价值，草菇在药用领域也表现出色，传统医学认为其性凉、味甘、无毒，能益脾补气，清热解暑，对夏季暑热烦躁、体虚气弱及高血压患者均比较适合，且因其含有大量维生素C，常食可有效对抗坏血病，还具备改善脑功能、提高智力的作用。

然而，草菇是典型的高温型食用菌，对生长温度要求苛刻。菌丝生长的适宜温度为30℃-39℃，低于15℃或高于42℃就会停止生长；子实体生长温度范围为28℃-33℃，20℃以下的低温或45℃以上的高温都会致使小菇蕾萎蔫死亡。当生长温度低于15℃时，草菇菌丝体活力下降、生长变缓甚至死亡；贮藏温度低于15℃时，草菇子实体在12h内就会发生自溶。这一低温自溶的特性严重制约了草菇菌种的保藏以及子实体的生产流通，对草菇产业的健康可持续发展形成了巨大阻碍。

在植物应对逆境胁迫的过程中，抗氧化系统发挥着关键作用，其中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）等抗氧化酶是抗氧化系统的重要组成部分。SOD能够催化超氧阴离子自由基发生歧化反应，生成过氧化氢和氧气；POD可以利用过氧化氢催化多种底物氧化；CAT则能高效分解过氧化氢生成水和氧气。在低温胁迫下，植物细胞内会产生活性氧（ROS），若不能及时清除，就会对细胞造成氧化损伤，而这些抗氧化酶能够协同作用，有效清除ROS，维持细胞内的氧化还原平衡，从而增强植物对低温胁迫的耐受性。目前，关于草菇在低温胁迫下的研究，多集中于形态变化、差异蛋白质组学以及转录组水平的分析。例如，通过蛋白质组学技术研究发现，草菇在低温胁迫下有64种上调蛋白质和268种下调蛋白质响应，涉及能量代谢等多种代谢过程；利用表达谱芯片技术解析低温胁迫初期草菇转录组水平的变化，发现不同时间段基因功能和代谢通路存在差异。但对于草菇在低温胁迫下抗氧化应答反应中关键酶的表达量变化及活性研究还相对较少，深入探究这一领域，有助于揭示草菇低温胁迫的分子机制，为解决草菇低温自溶问题提供理论依据，对推动草菇产业的发展具有重要意义。

1.2国内外研究现状

草菇作为一种重要的热带亚热带菇类，其生物学特性、低温胁迫响应机制以及抗氧化系统等方面一直是国内外学者关注的焦点。

在草菇生物学特性方面，众多研究对其形态特征、生长发育规律等进行了系统剖析。草菇在植物分类学上属于真菌门、担子菌纲、伞菌目、鹅膏菌科、草菇属，由菌丝体和子实体两部分组成。菌丝体按发育顺序可分为单核菌丝、双核菌丝和结实性双核菌丝，其白色至淡黄色，透明或半透明，多数含一个细胞核，有少量或大量厚垣孢子；子实体由菌盖、菌褶、菌柄和菌托等部分构成，菌盖幼时黝黑，老时褪为灰褐色或灰白色，中央色深，边缘完整，表面光滑。草菇的生活史从担孢子萌发开始，历经菌丝体生长发育，形成子实体并产生新一代担孢子，且属初级同宗结合的菌类。

针对低温胁迫对草菇的影响，国内外研究从多个层面展开。在生理层面，研究发现低温胁迫会导致草菇细胞膜透性增加、膜脂过氧化加剧，从而破坏细胞的正常结构和功能。例如，当草菇处于低于15℃的低温环境时，菌丝体活力显著下降，生长速度减缓甚至停止，子实体则会在12h内发生自溶现象，严重制约了草菇的生产和流通。在分子层面，通过蛋白质组学和转录组学技术揭示了草菇在低温胁迫下的响应机制。蛋白质组学研究表明，草菇在低温胁迫下有64种上调蛋白质和268种下调蛋白质，这些差异蛋白质涉及能量代谢、物质合成与分解等多个代谢过程；转录组学分析发现，在低温诱导初期（0-120min），不同时间段草菇基因功能和代谢通路存在差异，如低温处理20min内变化基因的功能与单加氧酶、氧化还原酶和细胞内的氧化还原相关，40min时表达差异基因具有结合RNA的功能，80min时基因功能集中于核酸物质和能量的代谢。

抗氧化系统在草菇应对低温胁迫中发挥着关键作用，其中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）等抗氧化酶是研究的重点。SOD能够催化超氧阴离子自由基发生歧化反应，