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第1页，共32页，星期日，2025年，2月5日动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植动物细胞工程常用技术第2页，共32页，星期日，2025年，2月5日一、动物细胞培养1.发展历史:20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。第3页，共32页，星期日，2025年，2月5日1.动物细胞培养的概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.一、动物细胞培养第4页，共32页，星期日，2025年，2月5日动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液10代细胞部分细胞“癌变”，无限传代动物细胞培养不能最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞2.动物细胞培养过程：第5页，共32页，星期日，2025年，2月5日思考讨论：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。第6页，共32页，星期日，2025年，2月5日有关概念:原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。第7页，共32页，星期日，2025年，2月5日4、动物细胞培养的条件无菌、无毒的环境：无菌处理、加抗生素、定期更换培养液营养：特别加入血清或血浆温度和PH：36.5度左右\PH为7.2~7.4气体环境：O2—细胞呼吸必需；C2O—维持PH值第8页，共32页，星期日，2025年，2月5日4.动物细胞培养技术的应用:1.蛋白质生物制品的生产如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体2.健康细胞培养培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植3.细胞的生理、药理、病理研究第9页，共32页，星期日，2025年，2月5日植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目原理培养基结果培养目的植物组织培养动物细胞培养植物细胞全能性细胞增殖固体营养物质植物激素液体营养物质动物血清培养成植株培养成细胞群快速繁殖培养无病毒植株获得细胞或细胞产物第10页，共32页，星期日，2025年，2月5日思考：2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基2、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体第11页，共32页，星期日，2025年，2月5日四、核移植技术动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.第12页，共32页，星期日，2025年，2月5日黑面绵羊去核卵细胞白面绵羊乳腺细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激早期胚胎胚胎移植另一头绵羊的子宫妊娠、出生克隆羊多利1.克隆羊培育过程第13页，共32页，星期日，2025年，2月5日2.体细胞核移植技术的应用前景第14页，共32页，星期日，2025年，2月5日思考下列问题：1、什么叫动物细胞融合？2、动物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？第15页，共32页，星期日，2025年，2月5日一、动物细胞融合细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合受精作用第16页