蛋白质的构件氨基酸.pptVIP

NGly—Ala—Ser—Leu—PheCDNS—Gly—Ala—Ser—Leu—PheC水解产物：DNS—Gly、Ala、Ser、Leu、PheDNS-AA在紫外光激发后发黄色荧光。DNS第29页，共49页。2.烃基化反应α-氨基中的氮是一个亲核中心，能与烃基（包括环烃及其衍生物）发生亲核取代反应，如Edman反应（可鉴定多肽的NH2末端氨基酸）。第30页，共49页。Edman反应(苯异硫氰酸酯，PITC)产物：苯乙内酰硫脲衍生物（PTH-氨基酸），无色，可以用层析法分离鉴定。被Edman用来鉴定多肽的NH2末端氨基酸。第31页，共49页。（三）茚三酮反应与茚三酮反应（★）茚三酮在弱酸中与α-氨基酸共热，引起氨基酸的氧化脱氨、脱羧反应，最后，茚三酮与反应产物——氨和还原茚三酮反应，生成紫色物质。氨基酸与茚三酮的反应过程第32页，共49页。用纸层析和柱层析把各种氨基酸分开后，用茚三酮显色可以定性鉴定，并在570nm定量测定各种氨基酸。Pro、Hy-Pro与茚三酮直接形成黄色化合物。第33页，共49页。（四）?侧链官能团的特异反应—用于蛋白质的化学修饰氨基酸侧链含有羟基、酚基、巯基、吲哚基、咪唑基、胍基、甲硫基等。蛋白质的化学修饰：在温和条件下，以可控制的方式使蛋白质与某种试剂发生特异反应，引起蛋白质中个别氨基酸侧链或功能团发生共价化学改变。Cys(－SH)卤化烷（碘乙酸等）：保护巯基，防止重新被氧化；2—硝基苯甲酸：分光光度法定量测定巯基；易被氧化成胱氨酸胱氨酸的氧化（产物：磺基丙氨酸。氧化剂：过甲酸）胱氨酸的还原（产物：半胱氨酸。还原剂：巯基乙醇等）第34页，共49页。七、氨基酸的旋光性和光谱性质（一）氨基酸的旋光性和立体化学1.氨基酸的构型氨基酸构型：L型、D型。第35页，共49页。第1页，共49页。4.蛋白质的分类1）按组成：简单蛋白质（表2－1）：缀合蛋白质（表2－1）：（注意辅基的组成）2）按生物学功能分：酶、运输蛋白、营养和贮存蛋白、激素、受体蛋白、运动蛋白、结构蛋白、防御蛋白等。3）按形状和溶解度：纤维状蛋白质：不溶于水,结构作用；球状蛋白质：易溶于水，细胞中大多属可溶性蛋白；膜蛋白质：不溶于水,与细胞的各种膜系统结合。第2页，共49页。酸水解：H2SO4或HCI能使蛋白质完全水解；不引起消旋作用，但色氨酸完全被破坏，天冬酰胺、谷胺酰胺脱酰胺基；碱水解：NaOH能使蛋白质完全水解；色氨酸稳定，但大多数氨基酸遭破坏并引起消旋现象；酶水解：部分水解；不产生消旋，不破坏氨基酸；主要用于蛋白质一级结构分析，如：胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶等。二、蛋白质的水解

第3页，共49页。三、氨基酸的一般结构??????????结构通式：与羧基相连的Cα上都有一个氨基，氢原子和可变的R基。如图aa结构通式：除Gly外,Cα是不对称C：1.具有两种立体异构体[D-型和L-型]2.具有旋光性[左旋（-）或右旋（+）]第4页，共49页。四、氨基酸的分类（一）基本氨基酸：组成蛋白质的常见氨基酸（有20种）。（二）不常见的蛋白质氨基酸：不常见但在某些蛋白质中存在。是多肽合成后由基本aa经酶促修饰而来(约10种)。（三）非蛋白质氨基酸：存在于生物体内但不参与蛋白质组成的氨基酸(约200多种)。第5页，共49页。按R基的化学结构：中性氨基酸1.脂肪族氨基酸含羟基或硫的氨基酸酸性氨基酸及其酰氨碱性氨基酸2.芳香族氨基酸3.杂环族氨基酸（一）?常见的蛋白质氨基酸（20种）第6页，共49页。（1）中性氨基酸（5种，甘丙缬亮异）R基均为中性烷基，R基对分子酸碱性影响很小。Gly是唯一不含手性碳原子的