2025年病理生理学抗疲劳抗缺氧实验设计方案.pdfVIP

百学须先立志。——朱熹

病理生理学实验设计方案

百学须先立志。——朱熹

课题：补肺活血胶囊对大鼠抗疲劳作用研究

实验目的：研究补肺活血胶囊的抗缺氧，抗疲劳的作用及作用机制

实验原理：临床研究表明：补肺活血胶囊具有降低全血粘度，降低血气中二氧化

碳分压，提高氧分压，氧饱和度，改善肺通气功能，使机体获得更多的氧气，促

进体内血糖的有氧氧化生成更多的ATP供体利用，增加肝糖原与肌糖原的储备

（糖原的生成需要消耗ATP），同时减少由供氧不足而引起的乳酸等代谢产物的

堆积，从而减达到抗疲劳的作用。

实验内容：

一、材料、试剂、仪器和实验动物

1.1药品补肺活血胶囊（广东远大药业有限公司提供）、肾上腺素

1.2试剂血乳酸测定试剂盒、丙二醛测定试剂盒、血尿素氮测定试剂盒、谷

胱甘肽测定试剂盒、血乳酸脱氢酶测定试剂盒、和超氧化物歧化酶测定试剂

盒

1.3器械、仪器灌胃针、小鼠玻璃游泳缸（自制,规格70cm×70cm×60cm）、

电子分析天平、721型分光光度测定仪、匀浆机、离心机、离心管、秒表等。

1.4实验动物清洁级单一雄性昆明种小鼠8只及基础饲料

二、实验方法

2.1分组与给药

实验动物分组:选用单一雄性昆明种小鼠80只,游泳实验和常压耐缺氧实验

中各设空白对照组、补肺活血胶囊低，高组和肾上腺素组，共八组，每组10只

小鼠（见表1）。

补肺活血胶囊低、高剂量组每天按0.86g/kg，3.44g/kg的浓度给予给予灌胃

（灌胃前药液摇匀且灌胃体积小于1.5ml），肾上腺素组按0.2mg/kg的浓度给予

肾上腺素腹腔注射（给药期间应根据全部小鼠平均体重的增加对灌胃量做适当调

整）,空白对照组给与同体积的生理盐水灌胃。小鼠每次灌胃前断食2h,每天灌胃

博观而约取，厚积而薄发。——苏轼

1次，连续7天;基础饲料自由摄食;2d换水1次。

表1.实验动物分组（共8组，每组1只）

空白对照组低剂量组高剂量组肾上腺素组

游泳实验

常压耐缺氧实验

2.2指标测定方法

2.2.1游泳实验：小鼠连续给药7d后，每组小鼠于末次灌胃前禁食12h，

在末次给药1h后将小鼠放入游泳箱内做力竭游泳实验。小鼠尾部负重为体重5%

的铁丝,放入自制玻璃游泳缸游泳,水深约为35cm，水温25摄氏度,计取游泳开

始到小鼠游泳疲劳而沉入水中8s不能浮起为止的时间为游泳时间。并立即取出

肝脏,制作肝脏匀浆，离心机分离取上清备用。

2.2.2常压耐缺氧实验：小鼠连续给药7d后,每组小鼠于末次灌胃前禁食

12h，在末次给药1h后将小鼠放进250ml的密封性好的磨口玻璃瓶内,将用纱布

包好的15g钠石灰装入瓶内,将小鼠放入瓶内后立即用凡士林密封盖紧,当小鼠开

始出现全身性痉挛症状时,立即开启瓶盖,将动物取出。记录从密封至小鼠发生全

身性痉挛的时间。并立即取出肝脏,制作肝脏匀浆，离心机分离取上清备用。

2.2.3生化指标检测：采用肝脏匀浆上清,按照试剂盒的方法分别测定以下

血生化指标：1.血乳酸(BLA)含量,2.丙二醛(MDA)含量,3.血尿素氮(BUN)含量,

4.谷胱甘肽(GSH)含量5.乳酸脱氢酶(LDH)活性,6.超氧化物歧化酶(SOD)活性。

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