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第七章??细菌感染的检查与防治
感染性疾病的病因学诊断
确定感染的微生物,为临床诊断提供根据。
由于该诊断是通过确定感染的微生物而确立的,故称微生物学诊断(病原学诊断)。
关系到正确的治疗、控制和预防。
;检查方法
微生物学(细菌的形态学检查、分离培养和鉴定)
免疫学(查Ag或Ab)
分子生物学(查核酸);
;现在是4页\一共有42页\编辑于星期四;(一)细菌形态学检查
针对一些在形态与染色上具有特征的
病原菌。
1)光学显微镜
2)染色法检查
;(二)细菌分离培养与鉴定
主要内容:
1、细菌分离培养—菌落大小、色素、溶血;
2、涂片、染色、镜检。
尤其用于在形态、排列和染色性方面无特
征的某些病原菌的检查。
阳性率高于直接镜检,但时间长。
;革兰染色原理:细胞壁结构不同。
G+结构致密、肽聚糖层厚、乙醇不易透入;乙醇使胞壁脱水形成一道屏障,短暂阻止结晶紫-碘复合物从胞内渗出;
G-疏松、肽聚糖层薄、外膜均含大量脂质,易被乙醇溶解,使胞壁通透性增高,胞内结晶紫-碘复合物被溶解脱出而脱色。;革兰染色实际意义---
鉴别细菌
选择用药
研究细菌致病性
其它染色有:
单染色、抗酸染色、特殊染色等。;抗酸染色法;特殊染色法:鞭毛染色
荚膜染色
负染色法;2、生化反应
现有“程序控制的自动分析仪”。
3、血清学鉴定:用已知Ab鉴定从标本中分离培养出的未知菌(玻片法简便易行)。
分群、分型;4、动物试验
用于:①分离鉴定病原菌;
②测定细菌的毒力及产毒性
选用高度易感、健康等条件的动物。
;如:毒素-抗毒素中和试验---小白鼠;
钩端螺旋体---幼龄豚鼠、金地鼠。
;5、药物敏感试验
指导临床选择用药,及时治疗和控制感
染有重要意义。
;
;6、自动微生物鉴定和药敏分析系统:
微生物编码鉴定技术---数据库
微量培养
自动监测分析
自动记录药敏结果
;(三)细菌抗原的检测
用已知Ab检测未知抗原(Ag-Ab反应)。
优点--特异、灵敏、简便
方法:玻片凝集、协同凝集、间接血凝试验、乳胶凝集、对流免疫、酶免疫技术、免疫荧光技术。
;载体颗粒
SPA、乳胶;酶联免疫吸附试验(ELISA,间接法)
;对流免疫电泳;免疫扩散试验;(四)细菌核酸的检测
核酸杂交、PCR、16SrRNA基因测序、基因芯片等技术。
更特异、敏感、快速;5’;检测PCR产物;三、细菌感染的血清学诊断(serologicaldiagnosis)
查Ab:检测病人血液中由于细菌感染而产生的特异性抗体,辅助临床诊断。
广泛用于多种病原体的微生物诊断和流行病学调查。
;双份血清:早期(急性期)
晚期(恢复期)
结果:根据双份血清中测到的抗体效价,
若升高4倍或以上,有辅助诊断价值。
方法:凝集试验,中和试验,ELISA等。
;现在是27页\一共有42页\编辑于星期四;致病菌的检验程序;第二节细菌感染的特异性预防
一、人工主动免疫(artificialactiveimmunization)
(一)疫苗、类毒素
1、死疫苗—伤寒、霍乱等。
2、活疫苗—BCG、鼠疫等。
;疫苗接种;现在是31页\一共有42页\编辑于星期四;;3、亚单位疫苗(subunitvaccine)
利用现代生物技术,除去细菌或病毒无关有害成分,分离提取纯化对人体有保护性的抗原。如:肺炎链球菌、脑膜炎球菌的荚膜多糖疫苗,+佐剂即成。
接种少量抗原可使人体产生良好免疫应答,且接种反应轻微。;优点
a、去除引起副反应的物质;
b、因不含核酸可免去减毒活疫苗回复突
变及灭活全疫苗发生感染性复活的可能;
c、消除肿瘤病毒潜在的致癌作用;
d、可利用化学试剂分解病毒体。;4、基因工程疫苗
本质上是亚单位疫苗
如:含宋内志贺菌表面抗原质粒的伤寒沙门菌Ty21a
优点:安全、经济、可批量生产;
缺点:抗原的回收纯化困难。
;5、重组载体疫苗
将抗原表位的目的基因片段转入减毒的病毒或细菌。
形式:整合于病毒、细菌基因组或质粒
本质:活疫苗;6、核酸疫苗(DNAVaccine
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