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DNA粗提取鉴定课件

XX有限公司

20XX

汇报人：XX

目录

01

DNA粗提取原理

02

实验材料与设备

03

DNA粗提取步骤

04

DNA鉴定技术

05

实验结果与讨论

06

实验注意事项

DNA粗提取原理

01

细胞结构概述

真核与原核细胞

结构复杂程度不同

细胞基本结构

细胞膜、质、核组成

01

02

DNA的分布与存在

DNA主要存在于细胞核染色体

DNA主要分布

在细胞质中线粒体、叶绿体含DNA

细胞器中存在

噬菌体、部分动植物病毒含DNA

病毒中也含DNA

提取方法原理

利用DNA在不同浓度NaCl中溶解度差异进行提取。

溶解度差异

DNA不溶于冷酒精，用冷酒精沉淀DNA，去除杂质。

酒精沉淀法

实验材料与设备

02

所需实验材料

提供DNA来源，常用于粗提取实验。

鸡血细胞液

用于去除杂质，沉淀DNA。

洗涤剂与酒精

调节溶液浓度，促进DNA析出。

食盐与柠檬酸钠

实验仪器与工具

离心管与试管

用于分装和混合实验样本。

移液器与枪头

精确吸取和转移微量液体。

恒温水浴锅

提供稳定的温度环境，用于DNA溶解与酶反应。

安全防护措施

佩戴手套和护目镜，保护手部与眼睛免受伤害。

手套与护目镜

实验人员需穿戴实验服，防止试剂溅到身上。

实验服穿戴

DNA粗提取步骤

03

细胞裂解过程

机械破碎与酶解法

去垢剂与保护液

细胞破碎方法

去除杂质保护

DNA的沉淀与分离

将溶液冷却，使DNA沉淀析出，便于后续分离。

冷却析出DNA

通过离心操作，将DNA沉淀与溶液分离，获取纯净的DNA样本。

离心分离DNA

DNA的纯化处理

利用蛋白酶或NaCl溶液浓度差异去除

去除杂质蛋白

01

加入冷酒精降低DNA溶解度，使其析出

DNA沉淀析出

02

DNA鉴定技术

04

电泳技术原理

DNA等带电粒子在电场中迁移，速率受粒子尺寸、形态等影响。

带电粒子迁移

DNA片段在凝胶中迁移速度不同，实现分离，小片段迁移快，大片段迁移慢。

凝胶基质分离

电泳操作步骤

选择合适浓度，加热溶解后制胶。

制备琼脂糖凝胶

DNA样品混合缓冲液后加样，设置电压电泳。

加样电泳

结果分析与解释

01

电泳图解读

根据电泳条带位置判断DNA片段大小。

02

条带亮度分析

条带亮度反映DNA浓度，亮度越高浓度越大。

实验结果与讨论

05

实验结果展示

展示DNA电泳图，分析条带位置与亮度，判断DNA提取效果。

电泳图分析

通过紫外分光光度计测定DNA浓度，展示测定结果，评估提取纯度。

浓度测定结果

结果分析方法

通过电泳图判断DNA的提取效果与纯度。

电泳图分析

利用紫外分光光度计检测DNA浓度与质量。

紫外吸收检测

实验误差与改进

探讨实验步骤中可能的操作失误及其对结果的影响。

操作误差分析

01

分析试剂纯度、浓度等因素对实验结果产生的误差及改进措施。

试剂质量影响

02

实验注意事项

06

实验操作要点

实验前对所有器材进行严格消毒，避免外源DNA污染。

器材消毒

操作中注意温度控制，防止DNA在高温下降解。

温度控制

确保所有溶液的准确配比，以保证实验效果。

溶液配比

常见问题及解决

试剂配制错误

选择专业试剂盒，现配现用二苯胺试剂。

材料处理不当

确保细胞状态良好，研磨充分。

01

02

实验安全须知

实验时需佩戴手套、口罩，以防化学试剂伤害。

防护装备佩戴

注意试剂的存放和使用，避免误食或溅入眼睛，操作后洗手。

试剂使用安全

谢谢

Thankyou