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第一节免疫细胞化学原理★
第二节免疫细胞化学方法
;;免疫反应的特异性表现在：
抗原作为一类结构复杂的大分子能刺激机体
产生对其特异的抗体并与抗体发生反应
抗体针对某种抗原分子而产生的，特异地识
别该抗原并与其结合
;免疫细胞化学反应的原理：;;抗原;;;抗原：
凡能刺激机体产生抗体并能与
抗体特异结合的物质称为抗原
抗原性：
物质所具有的这种特性称为抗原性
;
细胞中具有抗原性的化学成分有：
蛋白质多肽脂蛋白多糖
脂多糖糖蛋白核蛋白
这些生物大分子都能用免疫细胞化学技术检测吗?
从生物学功能来看都包括了哪些物质?
;
酶、受体、抗体、细胞外基质
激素、细胞结构蛋白、病原体等
;
;Fab片段具有抗体活性，决定某种抗体
与抗原结合的能力和特异性;免疫细胞化学技术中所用的抗体有两种：
抗血清—多克隆抗体，是用提纯的抗原
免疫动物后从动物血清制备得
到的
单克隆抗体—是指由单个产生特异抗体的
Ｂ淋巴细胞分化增殖形成的
细胞克隆产生的抗体
;
;
免疫荧光技术将荧光素作为标记物
使组织细胞中形成的抗原抗体复合
物在荧光显微镜下可见，从而显示
抗原物质的定位
;１.异硫氰酸荧光素２.四乙基罗达明
３.四甲基异硫氰酸罗达明４.藻红蛋白
▲分子量不同▲最大吸收光谱不同
▲最大发射光谱不同▲与蛋白结合方式不同
▲呈现不同的荧光：黄绿色荧光
橙色荧光
橙红色荧光等
;
荧光：
在激发光（荧光显微镜提供）的照射下，能发出较激发光波长更长的可见光并随照射停止而消失
荧光显微镜：
荧光显微镜的光源提供各种??发光，如
紫外光、蓝紫光（有不同的波长范围）
使受检标本内的荧光物质发光
;
是将酶作为标记物使组织细胞中形成的抗原抗体复合物得到标记，再通过酶细胞化学反应产生显微镜下可见的显色物质，间接显示抗原物质的定位
;1.反应产物定位准确，颜色对比清晰
2.反应后标本材料可长期保存
3.能用于电镜观察
;;;;;;;２.碱性磷酸酶（Alkalinephosphotase,AKP）;利用两种物质高度亲和力而互相结合定位特异分子
亲和物质具有多价能力的物质，与亲和物质有高
度亲和力又能与抗体、蛋白质及各种标
记物(荧光素、酶、胶体金等)结合
最常用的亲和物质系统：
1、生物素（biotin）与亲和素（avidin）
两者结合能力为不可逆的
2、葡萄球菌A蛋白与免疫球蛋白IgG
;
(1)标记亲和素－生物素技术
（Labeledavidinbiotin,LAB）
(2)桥式亲和素－生物素技术
（Bridgedavidinbiotin,BAB）
(3)亲和素－生物素-酶复合物技术
（Avidin-biotinperoxidasecomplex
method，ABC）;;;
利用亲和素为桥梁
连接生物素化的抗
体和生物素化的酶
;亲和素－生物素-酶复合物技术;葡萄球菌A蛋(StaphylocalproteinA
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