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天然产物生物活性评价的体外实验方法创新

目录

内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1天然产物生物活性的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2体外实验方法在天然产物评价中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

组织与细胞模型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.1常用的体外细胞模型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1.1干细胞．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1.2成熟细胞．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

2.1.3转化细胞．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.2组织模型的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.2.1血管内皮细胞．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.2.2肌细胞．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.2.3神经元．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

抗菌活性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

3.1微生物培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

3.1.1细菌培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

3.1.2真菌培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

3.2抗菌实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

3.2.1平板计数法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

3.2.2超滤法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

3.2.3微孔板测定法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

抗肿瘤活性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

4.1细胞增殖抑制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

4.1.1MTT增殖实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

4.1.2利用CCK8测定细胞死亡率．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

4.2细胞周期分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

4.3抗转移性能评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

抗氧化活性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

5.1自由基清除能力．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．58

5.2抗氧化酶活性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61

5.2.1SOD活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．66

5.2.2CAT活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．67

抗炎活性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．69

6.1细胞炎症反应．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．71

6.1.1NFkB活性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．72

6.1.2IL6和TNFα表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．74

6.2抗炎实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．76

6.2.1LPS诱导