第十章组织培养快速繁殖技术.pptVIP

植物组织培养湖北生态工程职业技术学院生物工程系*植物组织培养湖北生态工程职业技术学院生物工程系*第十章组织培养快速繁殖技术第1页，共35页，星期日，2025年，2月5日植物界三大生殖方式及其特点有性生殖、无性生殖、无融合生殖一、有性生殖概念：通过雌雄性的生殖细胞的结合产生种子和果实，再由种子发芽形成新的个体的生殖方式，特点：可以结合父母本的优良性状，如:杂种优势等，但同时造成了后代遗传性状不一致(基因型不一致，发生分离)第2页，共35页，星期日，2025年，2月5日有性生殖假设雌株的基因型为AB,其经过减数分裂产生的配子为A和B雄株基因型为ab,其经过减数分裂产生的配子为a和b其后代基因型为:ABaAaBabAbBb第3页，共35页，星期日，2025年，2月5日有性生殖雌雄同株或同花时,假设植株的基因型为AB,产生的配子(生殖细胞)为A和B两种,其后代的基因型为:ABAAAABBABBB第4页，共35页，星期日，2025年，2月5日二、无性生殖概念：不通过生殖细胞，而直接用营养体繁殖的方式，又叫营养繁殖.特点：后代遗传形状完全相同，产生的一个后代群称为无性系，无性系群体中的个体表现出一致的性状，具有作为商品的一致性.第5页，共35页，星期日，2025年，2月5日无性生殖常规的无性繁殖：分株、扦插、嫁接、或利用鳞茎、球茎、块茎、块根等进行繁殖组织培养快速繁殖（微体繁殖）：也是无性繁殖，优点：有较短的时间和较少的空间，由一个个体产生大量的植株第6页，共35页，星期日，2025年，2月5日三、无融合生殖指发生在植物的生殖器官中，不经过精卵融合，而以种子进行繁殖的生殖方式.如：孤雌生殖或孤雄生殖发生在少数物种中，发生频率极低第7页，共35页，星期日，2025年，2月5日组织培养快速繁殖技术的必要性和优越性大多数果树和观赏植物都是高度杂和的，它们的后代会发生分离而性状不一致。要得到遗传一致的个体，就必须采用无性繁殖的方法.优越性：可以在短时间内获得大量的遗传一致的个体.第8页，共35页，星期日，2025年，2月5日组织培养快速繁殖技术的建立一、试管苗的初代培养（一）无菌培养物的建立1.外植体的选择2.培养基的配制（选择）和灭菌3.外植体的选择和消毒4.接种第9页，共35页，星期日，2025年，2月5日无菌培养物的建立注意事项：污染经验：一般的污染，在接种后2-3天就可以出现.原则：由于外植体和培养环境所残留的微生物中，有的细菌和真菌生长很缓慢，需要一定的时间和条件才能出现污染，一般20天后没有污染才能确定没有污染.第10页，共35页，星期日，2025年，2月5日细菌污染现象：外植体周围形成细菌膜，逐渐产生粘液或浑浊的水迹，并进一步在培养基与外植体接触处产生气泡，时间长了会出现乳白色或橙黄色的菌落，成圆形并很快扩大.原因：在某一个环节消毒不彻底，如：外植物消毒不彻底、无菌水消毒不彻底；或操作人员违反操作规程，在接种的同时，说话、咳嗽等都能引起污染.第11页，共35页，星期日，2025年，2月5日真菌污染现象：在培养基中真菌孢子存在的地方产生白色菌丝，可以在外植体和培养基中看到，在夏天阴雨天、空气湿度的时，甚至在棉塞表面都可以看到.预防：定期对接种室和培养室进行消毒；定期检查超净工作台的滤膜是否因老化而失效；对已经污染的培养瓶，进行彻底灭菌后再清洗；第12页，共35页，星期日，2025年，2月5日培养基污染现象：在尚未接种的培养基的表面和中间产生细菌菌落，进一步产生气泡.特点是几乎同一锅灭菌的培养基都发生污染.对策：检查高压灭菌锅各主要部件如：压力表、放气阀等是否出现问题；操作过程中放气和控温是否规范；培养瓶的封口膜是否封好常见培养基污染的原因：灭菌锅内的冷空气未排净，从压力表看到的预定温度和压力，而灭菌锅内实际温度并达到压力表显示的指标，从而达不到彻底灭菌的效果.第13页，共35页，星期日，2025年，2月5日培养基的褐变现象:外植体在培养过程当中,由伤口表面出现褐色物质,颜色由浅变深,严重时可将材料周边的培养基染成褐色,影响外植体的启动、分化和生长.原因：外植体由自养变成异养，细胞代谢发生变化，产生了一些植物碱，主要是酚类化合物，被多酚氧化酶氧化成醌类物质，醌类物质呈棕褐色，扩散到培养基中，使培养基变成褐色，并影响外植体的生长，严重时会导致外植体死亡.第14页，共35页，星期日，202