生物选修3问题归纳.docVIP

选修3问题归纳

专题1：基因工程

1．DNＡ重组技术的基本工具：限制性核酸内切酶（限制酶),DNＡ连接酶,运载体。

2.基因工程中用到的酶,及其作用:

限制酶:切割DＮA。

ＤNＡ连接酶:把ＤNA片段拼接成新的DNA。

3.基因体现载体的构成：目标基因，开启子，终结子，标记基因。

４.开启子的作用:驱动目标基因转录出mＲNA，最终取得所需蛋白质。

５．终结子的作用：终结mRＮA的转录。

6．标记基因的作用：为了判别受体细胞中是否含有目标基因，从而将含有目标基因的细胞筛选出来。

７.基因工程的变异原理：基因重组。

8.DNＡ分子杂交技术的原理：碱基互补配对原则。

9.ＰCR技术的原理:DＮA双链复制的原理（碱基互补配对）。

１0.获取目标基因的方法:①从基因文库中获取。②运用PCR技术扩增。③运用化学方法人工合成。

11.将目标基因导入植物细胞的方法：①农杆菌转化法。②基因枪法。③花粉管通道法。

1２．将目标基因导入动物细胞的方法：显微注射技术。

１3.将目标基因导入微生物细胞的方法：用Ca2+

１4.检测目标基因是否插入受体细胞的方法:DＮA分子杂交技术。

15.检测是否转录出ｍRNA的方法:分子杂交技术。

１6.检测是否翻译出蛋白质的方法:抗原—抗体杂交。

１7.基因工程常用的载体有哪些:质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒

１8．培育转基因植物常用什么细胞做受体细胞:受精卵或体细胞。

19.培育转基因动物常用的细胞:受精卵

20.基因工程制药常用的受体细胞:微生物细胞

21.基因工程的载体必须具备的条件：

①可以在宿主细胞中复制并稳定地保存;

②具备一至多个限制酶切点，以便与外源基因连接

③具备某些标记基因,供重组DNＡ的鉴定和选择。

④对受体细胞无害

⑤载体ＤNA分子大小应适宜，以便提取和在体外进行操作

22.基因工程操作的关键环节:基因体现载体的构建

23.构建基因体现载体的目标:

①使目标基因在受体细胞中稳定遗传,而且可以遗传下一代。

②使目标基因可以体现和发挥作用。

２４.目标基因能否在真核生物中稳定遗传的关键:转基因生物的ＤNＡ上是否插入了目标基因。

2５.Ti质粒上的T—ＤNＡ的特点:

Ｔｉ质粒上的T—DNA（可转移的DＮA）可转移至受体细胞而且整合到受体细胞染色体的ＤNA上。

26．农杆菌转化法中构建基因体现载体时目标基因插入的部位：Ti质粒上的T—DNA上

专题2:细胞工程

１.细胞工程中用到的酶,及其作用：

纤维素酶，果胶酶:用于植物体细胞杂交技术中去除植物细胞壁。

胰蛋白酶：用于动物细胞培养技术中使剪碎的组织分散成单个细胞,和解除原代培养中细胞贴壁和接触抑制现象。

２.植物组织培养技术的原理:植物细胞的全能性。

３.植物体细胞杂交技术的原理：①植物细胞具备全能性。②细胞膜具备流动性。

4.动物细胞培养的原理：细胞增殖。

５.动物细胞融合技术的原理：细胞膜具备流动性。

６.动物(体)细胞核移植的原理：动物细胞核的全能性。

７.去除细胞壁（取得原生质体）的方法：运用纤维素酶,果胶酶去除细胞壁。

8.诱导植物原生质体融合的方法:

物理法:离心、振动、电击等。

化学法:聚乙二醇(ＰＥG)诱导。

9.培育无病毒植株的方法：

植物组织培养(选取植物分生区附近（如茎尖)的细胞进行组织培养,取得脱毒苗。)

10.制造人工种子的方法:植物组织培养（以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包裹得到的种子。）

1１.将动物细胞分散成单个细胞的方法：从健康动物体内取出组织块,剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶解决一段时间，使组织分散成单个细胞。

1２.去除卵母细胞的细胞核的方法：经过显微操作取出卵母细胞的细胞核。

１3.激活核移植的重组细胞使其分裂和发育的方法：用物理法或化学法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞,使其完成细胞分裂和发育进程。

１4.诱导动物细胞融合的方法:

物理法：离心、振动、电击等。

化学法:聚乙二醇（PEG）诱导。

生物法：灭活的病毒

1５.老式生产抗体的方法：

向动物体内反复注射抗原，使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需的抗体。

16.制备单克隆抗体时筛选出杂交瘤细胞的方法：

用特定的选择性培养基进行筛选（在该培养基上只有融合的杂种细胞才能生长）。

17.制备单克隆抗体时筛选出产生专一抗体的杂交瘤细胞的方法：

对经过选择性培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测。

１8.大量培养杂交瘤细胞及取得单克隆抗体的方法:

①在体外条件下做大规模培养，在培养液中取得单克隆抗体。

②注射到小鼠体内增殖,在小鼠腹腔中提取单克隆抗体

19.卵母细胞采集的方法:

①对于实验动物(如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等）:用促性腺激素解决,使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取卵子,直