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微生物蛋白基因工程表达系统构建

目录

文档概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.1.1微生物蛋白的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.1.2基因工程表达系统的发展历程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.1.3本研究的目的和预期成果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

1.2.1国外研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

1.2.2国内研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

1.3研究内容与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

1.3.1实验材料与设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

1.3.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

1.3.3数据收集与分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

微生物蛋白的基础知识．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.1微生物蛋白的定义与分类．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

2.2微生物蛋白的功能与应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.2.1功能介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.2.2应用领域．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.3微生物蛋白的提取与纯化技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

2.3.1提取方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

2.3.2纯化技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

基因工程表达系统概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

3.1基因工程表达系统的定义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

3.1.1定义解释．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

3.1.2系统组成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

3.2基因工程表达系统的类型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

3.2.1原核生物表达系统．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64

3.2.2真核生物表达系统．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．68

3.3基因工程表达系统的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．71

3.3.1在医药领域的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．73

3.3.2在工业领域的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．74

微生物蛋白基因工程表达系统构建的关键步骤．．．．．．．．．．．．．．．76

4.1基因克隆与质粒构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．78

4.1.1基因克隆的方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79

4.1.2质粒构建的步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．83

4.2宿主细胞的选择与培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．85

4.2.1宿主细胞类型选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．88

4.2.2宿主细胞的培养条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．92

4.3目的基因的导入与表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．