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动物细胞工程的主要技术第1页,共13页,星期日,2025年,2月5日动物细胞工程概念常用技术应用细胞学的方法,按照人们的需要和预定的设计,有目的、有计划地保存、改变动物细胞和创造新的动物细胞,进而培育成新的物种或者品种的一门科学技术。动物细胞培养(基础)动物细胞融合单克隆抗体动物体细胞克隆技术第2页,共13页,星期日,2025年,2月5日一动物细胞培养1.动物细胞培养条件(1)营养成分:培养液的主要成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。(2)气体环境O?:细胞呼吸消耗CO?:调节pH值(3)温度和pH:哺乳动物细胞培养环境温度控制在36.5℃~37.5℃,Ph7.2~7.4。第3页,共13页,星期日,2025年,2月5日动物细胞的培养过程幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础剪碎组织的目的?胰蛋白酶处理的目的?第4页,共13页,星期日,2025年,2月5日动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液原代培养胰蛋白酶剪碎细胞株细胞系遗传物质未改变遗传物质已改变2.动物细胞培养过程第5页,共13页,星期日,2025年,2月5日有关概念原代培养:经过滤、离心后将动物再接种到无菌的培养液中,在适宜的条件下进行静止或慢速转动培养,这个过程成为传代培养。传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。第6页,共13页,星期日,2025年,2月5日有关概念细胞株:传代培养的细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞株传代在40~50代内,遗传物质没有改变;细胞系无限传代下去,遗传物质改变。第7页,共13页,星期日,2025年,2月5日有关概念细胞贴壁:培养液中分散的动物细胞,置于适宜的条件下,能够分裂,这些细胞贴附在培养瓶上,成为细胞贴壁生长。细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖的现象。第8页,共13页,星期日,2025年,2月5日相关问题1.为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官和组织做动物细胞培养材料?胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛2.为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?分散成单个细胞便于物质交换,使营养物质吸收及代谢废物排出更容易,利于细胞生长和繁殖3.为什么用胰蛋白酶处理?在动物组织间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,它们将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官,而弹性纤维易被胰蛋白酶催化分解,从而使细胞分离开。第9页,共13页,星期日,2025年,2月5日相关问题4.培养的细胞为何贴壁生长?大多数组织细胞不适应悬浮生长,它们必须在固定的表面生长和分裂5.动物细胞培养能否像植物组织培养那样最终培养成生物个体?不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体第10页,共13页,星期日,2025年,2月5日
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