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罗氏同型半胱氨酸检测试剂盒(酶比色法)说明书

同型半胱氨酸检测试剂盒(酶比色法)说明书

【产品名称】

通用名称:同型半胱氨酸检测试剂盒(酶比色法)

英文名称:HomocysteineEnzymaticAssay(HCYS)

【包装规格】

100tests;

200tests;

试剂1:2x23ml,试剂2:2x5ml,试剂3:2x4ml

【预期用途】

应用于在Roche/Hitachi系统上,体外定量测定人血清和血浆中的总L-同型半胱氨酸。这

项测定可帮助诊断疑似存在高同型半胱氨酸血症或同型胱氨酸尿症。

概要1,2,3

同型半胱氨酸是细胞内甲硫氨酸脱甲基化产生的一种含有硫醇的氨基酸。总同型半胱氨酸

(tHcy)是指所有形式总同型半胱氨酸(Hcy)的总和,包括氧化形式、蛋白结合形式和游离

形式。tHcy水平升高已成为心血管疾病评估的一个重要风险因素。1,2,3血流中过多的Hcy

因其刺激性会造成动脉血管损伤,并导致炎症和斑块形成,最终造成流向心脏的血流受

阻。tHcy水平升高由4个主要因素造成,包括:

1.参与Hcy代谢的一些酶存在遗传缺陷,例如胱硫醚β合成酶(CBS)、甲硫氨酸合成酶

(MS)和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR);

2.B族维生素营养缺陷,例如B6,B12和叶酸;

3.肾脏氨基酸清除障碍;以及

4.药物相互作用,例如与一氧化氮、氨甲喋呤和苯妥英相互作用,干扰Hcy代谢。tHcy水

46

平升高还与阿尔茨海默氏病,神经精神疾病和骨质疏松有关。已经建立了临床实验室

Hcy测定指导原则。7,8

【检测原理】

同型半胱氨酸酶学测定法是基于一种新型酶循环测定原理,评估协同底物转化产物而非评

估Hcy的协同底物或Hcy转化产物。这项检测中,氧化型Hcy首先被还原为游离Hcy,然

后在HcyS-甲基转移酶催化下,再与一种协同底物(S-腺苷甲硫氨酸)反应形成甲硫氨酸

(Met)和S-腺苷高半胱氨酸(SAH)。SAH的评估是通过一种偶联的酶反应,其中SAH

经SAH水解酶催化形成腺苷(Ado)和Hcy,而Hcy又循环进入到Hcy转化反应中,这

样形成的一种反应循环扩大了检测信号。所形成的Ado立即水解为肌苷和氨,后者在谷氨

酸脱氢酶作用下反应,同时伴随有NADH转化为NAD+。样本中Hcy的浓度与转化为

NAD+的NADH的量呈间接正比(△A340nm)。

ADA

Ado肌醇+NH3

NH3+NADHGLDH

+谷氨酸+NAD++

2-酮戊二酸HO

206542921-1-

-2-

罗氏同型半胱氨酸检测试剂盒(酶比色法)说明书

【主要组成成份】

试剂1NADH试剂

S-腺苷甲硫氨酸0.1mmol/L,TCEP*0.5mmol/L,2-酮戊二酸5.0mmol/L,NADH0.2

mmol/L,缓冲液,pH9.1(25°C),防腐剂,稳定剂

试剂2酶试剂

高半胱氨酸S-甲基转移酶(HMTase)5.0kU/L,谷氨酸脱氢酶(GLDH)10kU/L,酪蛋白

(牛源)0.2%,缓冲液,pH7.2(25°C),防腐剂,去污剂

试剂3启动试剂

腺苷脱氨酶(HMTase)5.0kU/L,S-腺苷高半胱氨酸酶(SAHase)3.0kU/L,酪蛋白(牛

源)0.2%,缓冲液,pH7.2(25°C),防腐剂,稳定剂

*Tris(2-羧乙基)磷化氢

cobasc701/

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