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2025年医学检验HPLC专项理论考核试题及答案

一、单项选择题(每题2分,共30分)

1.高效液相色谱(HPLC)中,以下哪种固定相属于反相色谱常用填料?

A.氨基键合硅胶

B.C18键合硅胶

C.氰基键合硅胶

D.硅胶基质羟基填料

2.梯度洗脱过程中,流动相组成随时间线性变化的主要目的是?

A.提高柱效

B.缩短分析时间

C.改善复杂样品中各组分的分离度

D.降低检测器基线噪声

3.紫外检测器(UV)在HPLC中检测波长的选择依据是?

A.流动相的最大吸收波长

B.目标化合物的最大吸收波长

C.色谱柱填料的紫外截止波长

D.溶剂的截止波长与目标物吸收的重叠区域

4.以下哪种情况会导致色谱峰出现前沿现象?

A.进样量过大

B.流动相pH值与目标物pKa不匹配

C.色谱柱填料塌陷

D.流动相流速过低

5.用于HPLC的超纯水需控制的关键指标不包括?

A.电导率(≤0.1μS/cm)

B.总有机碳(TOC≤50ppb)

C.微生物含量(≤10CFU/mL)

D.氯离子浓度(≤1mg/L)

6.系统适用性试验中,理论塔板数(N)的计算公式为?

A.N=5.54(tR/W1/2)2

B.N=16(tR/W)2

C.A和B均正确

D.N=2π(tR/σ)2

7.生物样品(如血浆)预处理时,蛋白质沉淀法常用的试剂是?

A.乙腈

B.正己烷

C.二氯甲烷

D.乙酸乙酯

8.以下哪种检测器可用于无紫外吸收化合物的检测?

A.二极管阵列检测器(DAD)

B.示差折光检测器(RID)

C.荧光检测器(FLD)

D.电化学检测器(ECD)

9.HPLC色谱柱的柱温升高时,通常会导致?

A.保留时间延长

B.柱压升高

C.分离度降低

D.理论塔板数增加

10.流动相配制时,缓冲盐溶液的pH值需控制在色谱柱允许范围内,C18色谱柱的适用pH范围一般为?

A.2-8

B.1-14

C.3-7

D.0-2

11.梯度洗脱与等度洗脱相比,主要优势在于?

A.减少溶剂消耗

B.适用于成分复杂、保留差异大的样品

C.降低基线漂移

D.延长色谱柱寿命

12.进样器污染可能导致的问题是?

A.保留时间波动

B.峰面积重复性差

C.柱压异常升高

D.基线噪声增大

13.以下哪种物质不适合作为HPLC流动相?

A.甲醇(色谱纯)

B.四氢呋喃(分析纯)

C.超纯水

D.乙腈(HPLC级)

14.色谱峰拖尾因子(T)的合格标准通常为?

A.T≤0.95

B.0.95≤T≤1.05

C.0.95≤T≤1.5

D.T≥1.5

15.治疗药物监测(TDM)中,HPLC检测环孢素A时,常用的样品预处理方法是?

A.液-液萃取(LLE)

B.固相萃取(SPE)

C.蛋白沉淀结合SPE

D.直接稀释进样

二、多项选择题(每题3分,共30分,少选得1分,错选不得分)

1.HPLC泵的主要性能指标包括?

A.流量精度(RSD≤0.5%)

B.最大耐受压力(≥40MPa)

C.梯度混合精度(误差≤0.5%)

D.溶剂截止波长

2.影响色谱峰分离度(R)的因素有?

A.理论塔板数(N)

B.容量因子(k)

C.选择性因子(α)

D.流动相流速

3.色谱柱使用后维护的正确操作包括?

A.用100%有机溶剂冲洗30min

B.缓冲盐流动相使用后,先用10%甲醇水冲洗30min,再用纯甲醇封存

C.长期不使用时,两端密封并竖直存放

D.用强酸碱溶液冲洗去除残留杂质

4.紫外检测器基线漂移的可能原因有?

A.流动相混合不均匀

B.柱温波动

C.检测池污染

D.泵流量不稳定

5.生物样品预处理的目的包括?

A.去除干扰物质(如蛋白质、脂类)

B.浓缩目标analyte

C.改善色谱分离效果

D.提高检测器灵敏度

6.以下属于HPLC系统适用性试验内容的是?

A.理论塔板数

B.拖尾因子

C.重复性(RSD)

D.线性范围

7.流动相脱气的方法有?

A.超声脱气(10-15min)

B.氦气吹扫(5-10min)

C.真空抽滤脱气

D.加热至沸腾后

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