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基因工程及其应用课时;能发光的水母;能发荧光的热带斑马鱼;请您欣赏;能产生人胰岛素的大肠杆菌;

基因“嫁接”;一、基因工程

(一)概念:又叫做基因拼接技术或DNA重组技术

通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。;培育转基因大肠杆菌的简要过程:;;⑴环境监测:

基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。

即:生成磷酸二酯键

使其价格降低了30%-50%!

细菌的基因只存在于质粒上

C.

使其价格降低了30%-50%!

阅读课本P105讨论:转基因食品安全吗?

例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别

3、基因工程与环境保护

从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱;

2、基因工程在医学上的应用

AATTC

目的基因导入受体细胞;SmaⅠ;限制性内切酶(EcoRⅠ)作用过程;;被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?;2、基因的“针线”——DNA连接酶

连接酶的作用:

将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。

连接的部位:相邻的两个脱氧核苷酸的切口,

即:生成磷酸二酯键

DNA连接酶的作用过程:;;;作为运载体必须具备哪些条件?;;(4)与DNA有关酶的作用

DNA酶:即DNA水解酶,可以将DNA水解成脱氧核苷酸。

DNA聚合酶:在DNA复制的过程中,连接单个游离的脱氧核苷酸到DNA片段上,需要模板。

DNA连接酶:连接两个DNA片段,形成磷酸二酯键,不需要模板。

解旋酶:在DNA复制时,破坏氢键,使DNA双链打开。

限制性核酸内切酶:破坏脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。;例1、已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如下图中箭头所指?如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段?现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是()

A.3 B.4

C.9 D.12;DNA连接酶:连接两个DNA???段,形成磷酸二酯键,不需要模板。

大量的受体细胞接受不多的目的基因。

3)将目的基因导入受体细胞

能否让热带鱼也能发光?

根据已知的氨基酸序列合成DNA

处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。

转基因植物的安全性争论

原理:DNA分子杂交(碱基互补配对)

3、质粒是基因工程最常用的运载体,有关质粒的说法正确的是()

A.

所以一般不适用于真核细胞的基因。

GAATTC序列,并在G和A之间切开。

我国研究人员正在制备用于基因治疗的基因工程细胞

原理:DNA分子杂交(碱基互补配对)

如虫吃后中毒死亡,则说明摄入了抗虫基因并得到表达。

条件:(1)必须是单链;

人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产,均为解除人类的病苦,提高人类的健康水平发挥了重大的作用。

若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。;3、质粒是基因工程最常用的运载体,有关质粒的说法正确的是()

A.质粒不仅存在于细菌中,某些病毒也具有

B.细菌的基因只存在于质粒上

C.质粒为小型环状DNA分子,存在于拟核(或细胞核)外的细胞质基质中

D.质粒是基因工程中的重要工具酶之一;4、下列关于DNA连接酶的作用叙述,正确的是()

A.将单个核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯键

B.将断开的两个DNA片段的骨架连接起来,重新形成磷酸二酯键

C.连接两条DNA链上碱基之间的氢键

D.只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,而不能将双链DNA片段末端之间进行连接;二、基因工程的操作步骤;从细胞中分离出DNA;四个基本步骤:;1.目的基因的提取方法;;⑵人工合成基因法;1)反转录法:;利用PCR技术扩增目的基因;质粒;用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,在连拉酶的作用下连接形成重组DNA分子。;常用的受体细胞:;;大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。

将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。;受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗?;技

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