饲料中致病微生物的基因筛查技术规程.docxVIP

Q/LB.□XXXXX-XXXX

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ICS

65.120

CCS

B20

FORMTEXT44

FORMTEXT广东省地方标准

DBFORMTEXT44/TXXXX—2025

FORMTEXT

饲料中致病微生物的基因筛查技术规程

Codeofpracticeforscreeningof

pathogenicmicroorganismsgenesinfeed

（送审稿）

2025-XX-XX发布

2025-XX-XX实施

FORMTEXT广东省市场监督管理局??发布

STYLEREF标准文件_文件编号DB44/T2512—2024

STYLEREF标准文件_文件编号DB44/TXXXX—2025

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目次

TOC\o1-1\h前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4缩略语 2

5试剂和材料 2

6仪器设备 3

7采样 3

8试验操作 3

9防污染措施及生物安全要求 6

附录A（规范性）表A.1普通PCR检测的引物、扩增条带、反应参数 8

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由广东省畜牧业标准化技术委员会（GD/TC09）归口。

本文件起草单位：广东省科学院微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）。

本文件主要起草人：羊宋贞、章俊、陆雪影、郑湘玲、陈清莹、潘宝怡、王青柏、王永红、陈忆晴、荣向、陈艳、熊诗阳、陈颖麟、韩和悦、朱红惠。

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饲料中致病微生物的基因筛查技术规程

范围

本文件规定了配合饲料中金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、副溶血性弧菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、肺炎克雷伯氏杆菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、溶血性链球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、空肠弯曲杆菌、肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7检测的试剂和材料、仪器设备、采样、试验操作、生物安全要求等技术内容。

本文件适用于配合饲料中金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、副溶血性弧菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、肺炎克雷伯氏杆菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、溶血性链球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、空肠弯曲杆菌、肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7等致病菌致病基因的定性筛选。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.6食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验

GB4789.8食品安全国家标准食品微生物学检验小肠结肠炎耶尔森氏菌检验

GB4789.9食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验

GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验

GB4789.11食品安全国家标准食品微生物学检验溶血性链球菌检验

GB4789.30食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验

GB4789.44食品安全国家标准食品微生物学检验创伤弧菌检验

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T26426饲料中副溶血性弧菌的检测

GB/T26427饲料中蜡样芽孢杆菌的检测

GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测

GB/T42959饲料微生物检验采样

SN/T1022进出口食品中霍乱弧菌检验方法

SN/T1962食品中克雷伯氏菌检测方法

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

聚合酶链式反应polymerasechainreaction，PCR

PCR(聚合酶链式反应)是一种扩增目标DNA的技术，通过高温(95℃左右)使DNA变性成单链，低温退火(55℃左右)使引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72℃左右)，延伸互补