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诱导多能干细胞冻存工程师岗位考试试卷及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.诱导多能干细胞冻存常用的保护剂是（）

A.乙醇B.DMSOC.丙酮

2.冻存细胞时，一般降温速率是（）

A.1℃/minB.5℃/minC.10℃/min

3.诱导多能干细胞冻存液中血清比例一般为（）

A.10%B.50%C.90%

4.细胞冻存管应放置在（）中冻存。

A.液氮B.干冰C.普通冰箱

5.冻存细胞复苏时，一般在（）水浴中快速解冻。

A.30℃B.37℃C.42℃

6.检测冻存细胞活性常用的方法是（）

A.台盼蓝染色B.革兰氏染色C.瑞氏染色

7.诱导多能干细胞冻存前需进行（）。

A.传代B.计数C.染色

8.冻存细胞的标签应包含（）信息。

A.细胞名称B.冻存时间C.以上都是

9.细胞冻存的最佳密度是（）

A.1×10?/mlB.5×10?/mlC.1×10?/ml

10.以下哪种情况会影响细胞冻存效果（）

A.快速降温B.冻存液新鲜配置C.细胞状态差

多项选择题（每题2分，共10题）

1.诱导多能干细胞冻存的目的有（）

A.长期保存细胞B.避免细胞污染C.方便细胞运输

2.冻存液的组成成分通常有（）

A.基础培养基B.血清C.冻存保护剂

3.细胞冻存过程中需要注意（）

A.无菌操作B.缓慢降温C.标记清晰

4.影响细胞冻存复苏率的因素有（）

A.冻存保护剂浓度B.冻存时间C.复苏方法

5.冻存细胞复苏后，可能出现（）情况。

A.细胞活性低B.细胞污染C.细胞分化

6.检测冻存细胞复苏后的指标有（）

A.细胞活性B.细胞形态C.细胞增殖能力

7.诱导多能干细胞冻存常用的设备有（）

A.冻存盒B.液氮罐C.离心机

8.冻存细胞复苏时，需要注意（）

A.快速解冻B.及时转移至培养体系C.预热培养基

9.冻存过程中，以下操作正确的是（）

A.定期检查液氮罐液位B.冻存管密封良好C.随意更换冻存位置

10.选择冻存保护剂时，需要考虑（）

A.对细胞毒性小B.溶解性好C.价格便宜

判断题（每题2分，共10题）

1.诱导多能干细胞冻存不需要考虑细胞代数。（）

2.冻存细胞复苏后可直接用于实验。（）

3.DMSO可以直接加入细胞悬液中。（）

4.冻存细胞可以长期保存在-20℃冰箱。（）

5.细胞冻存过程中，降温速度越快越好。（）

6.复苏冻存细胞时，发现有部分细胞未解冻，可继续延长解冻时间。（）

7.冻存液配置后可长期保存使用。（）

8.检测细胞活性时，台盼蓝染色阳性表示细胞有活性。（）

9.不同批次的诱导多能干细胞冻存条件可以完全相同。（）

10.冻存细胞复苏后培养，发现细胞生长缓慢，一定是冻存过程出问题。（）

简答题（每题5分，共4题）

1.简述诱导多能干细胞冻存的基本步骤。

2.为什么冻存细胞复苏时要快速解冻？

3.冻存保护剂的作用原理是什么？

4.如何确保冻存细胞的质量？

讨论题（每题5分，共4题）

1.探讨在诱导多能干细胞冻存过程中，如何优化冻存条件以提高复苏率。

2.当冻存细胞复苏后出现细胞污染，应采取哪些措施？

3.对于诱导多能干细胞冻存的长期管理，你有哪些建议？

4.结合实际工作，谈谈在诱导多能干细胞冻存过程中遇到的困难及解决方法。

答案

单项选择题

1.B2.A3.C4.A5.B

6.A7.B8.C9.A10.C

多项选择题

1.ABC2.ABC3.ABC4.ABC5.ABC

6.ABC7.ABC8.ABC9.AB10.ABC

判断题

1.×2.×3.×4.×5.×

6.×7.×8.×9.×10.×

简答题

1.基本步骤：制备细胞悬液，加入冻存液，调整细胞密度；将细胞悬液分装入冻存管；放入程序降温盒，以1℃/min速率降温至-80℃；转移至液氮罐长期保存。

2.快速解冻可防止细胞内形成再结晶，避免冰晶对细胞结构造成损伤，从而提高细胞复苏后的活性。

3.冻存保护剂能降低细胞内外溶液的冰点，减少冰晶形成，降低细胞内水分在冻存过程中的丢失，保护细胞免受冷冻损伤。

4.确保细胞状态良好、选择合适冻存保护剂及浓度、严格无菌操作、控制降温与升温速率、定期检测细胞活性等。

讨论题

1.优化冻存条件可从调整冻存保护剂种类与浓度、优化降温与升温程序、选择合适细胞密度等方面入手，通过实验对比不同条件下的复苏率来确定最佳方案。

2.出现细胞污染，应立即停止培养，对污染细胞进行隔离处理；检测污染类型，对相关实验器材和培养环境进行消毒；重新复苏冻存细胞，严格无菌操作培养。

3.长期管理建议：建立详细冻存记录，包括细胞信息、冻存时间等；定期检查液氮罐等设备运行情况；定期复苏检测细胞活性和质量；合理规划冻存空间。

4.困难如细胞复苏率低，解决方法可优化冻存液配方、改进降温程序；污染问题则加强无菌操作规范、定期清洁设备和环境等。