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木豆中产牡荆苷内生真菌的分离、鉴定及其对MC3T3-E1细胞增殖影响的深入探究

一、绪论

1.1植物内生真菌概述

植物内生真菌是指在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部，而不引起宿主植物明显病症的一类真菌。这种共生关系可追溯至4亿多年前，1866年Bary首次提出“内生菌”概念，1898年Vogl首次从黑麦草种子中分离出内生真菌，此后相关研究不断深入。内生真菌广泛分布于各类生态系统的植物中，从沙漠植物到北极植被，宿主范围涵盖藻类、苔藓、蕨类、裸子植物以及单子叶和双子叶植物。在单子叶植物中，部分内生真菌产生的生物碱能帮助宿主抵御病虫害；在双子叶植物里，它们能促进植物生长、增强抗逆性。

植物内生真菌主要集中在子囊菌门、担子菌门、毛霉门和卵菌门。依据遗传关系、宿主植物和生态功能，可分为麦角菌内生真菌和非麦角菌内生真菌。前者多通过垂直传播，能协助宿主抵御生物和非生物胁迫；后者主要通过水平传播，生物多样性高、分布广泛，但与宿主的共生关系易受环境影响。内生真菌与植物形成共生关系时，需经过复杂的识别和感染过程。植物分泌的独脚金内酯等化学信号能吸引有益真菌，促进其菌丝生长、分支等。真菌通过特殊菌丝结构或分泌细胞壁降解酶等方式入侵植物，这会触发植物防御网络，植物通过模式识别受体识别相关分子模式，激活模式触发免疫，引发一系列生理反应，微生物分泌的效应蛋白也会触发效应子触发免疫，二者相互调节强化，还能诱导系统获得性免疫。而植物对内生真菌分子模式的反应称为诱导系统抗性，依赖茉莉酸和乙烯信号通路，且不积累病程相关蛋白。有益微生物进化出向宿主细胞输送效应分子的能力，调节宿主代谢，增强定植能力。例如菌根真菌的效应子能调节植物激素信号通路，促进共生关系建立。内生真菌应对植物防御主要有抑制宿主防御和降低自身可检测性以逃避植物识别两种策略。

内生真菌能促进植物对养分的吸收，如深色有隔内生真菌和Piriformosporaindica可改善植物根系结构，促进植物对氮、磷等养分的吸收，内生真菌产生的铁载体也有助于植物吸收铁，并与病原体竞争铁。许多内生真菌还能合成生长素和赤霉素等植物生长激素，调节宿主植物激素水平，如Epichlo?、Piriformospora等属的真菌能自主合成IAA，调节植物细胞分裂、伸长等过程。内生真菌的代谢产物具有丰富的生物多样性，包括生物碱、萜类、黄酮类、甾体类等化合物，这些代谢产物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等多种生物活性，在医药、农业、食品等领域展现出广阔的应用前景。

1.2木豆研究进展

木豆（Cajanuscajan(Linn.)Millsp.）属于豆科木豆属直立灌木，高1-3米，分枝众多，小枝有明显纵棱，被灰色短毛。叶为羽状3小叶复叶，小叶纸质，披针形或椭圆形，长5-10厘米，表面有极短灰白色毛，背面毛较密，呈灰白色，并有不明显的黄色腺点。其花序长3-7厘米，花数朵生于花序顶部或近顶部，花萼钟状，裂片三角形或披针形，花冠黄色，雄蕊二体。荚果线状长圆形，长4-7厘米，在种子间有明显凹下的斜槽，表面有灰褐色短毛，内有种子3-6粒，种子近圆形，稍扁，种皮暗红色，有时带有褐色斑点，花、果期为2-11月。

木豆是短日照作物，光照越短，越能促进花芽分化。其喜温，最适宜生长温度在18-34℃，适宜种植在海拔1600米以下地区，尤以海拔1400米以下地区产量最高。木豆具有较强的耐干旱能力，年降水量在600-1000毫米最为适宜，同时比较耐瘠，对土壤要求不严格，各类土壤均可种植，适宜的土壤pH值为5.0-7.5。木豆原产地可能是印度，在世界上热带和亚热带地区普遍栽培，在中国，主要分布于云南、四川、江西、湖南、广西、广东、海南、浙江、福建、台湾、江苏等地。

《中华本草》记载木豆“种子可入药，味辛、涩，性平；利湿消肿，散瘀止血。其根、叶均入药”。现代研究表明，木豆含有多种化学成分，包括黄酮类、萜类、甾体类等。其中黄酮类化合物如牡荆苷、异牡荆苷等具有多种药理活性。木豆在传统医学中被用于治疗多种疾病，如清热解毒，可用于治疗感冒、咳嗽、喉咙痛等症状；消肿止痛，对缓解肌肉疼痛、关节疼痛有一定效果；抗菌消炎，其含有的多种成分能有效抑制细菌生长和繁殖，可用于治疗皮肤感染、炎症等；养心安神，有助于改善失眠、焦虑、烦躁等症状；此外，木豆还能补充营养，其富含蛋白质、维生素、矿物质等营养成分，可提高机体免疫力。但使用木豆时需注意，并非人人适用，应根据自身情况合理选择，并遵循医生或专业人士的建议，严格控制使用方法和剂量，避免出现不良反应。

1.3牡荆苷研究现状

牡荆苷（vitexin）又名牡荆素，是一种天然植物黄酮