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电镜技术与细胞超微结构复习题

电镜技术与细胞超微结构复习题

1.电子显微镜是一种什么仪器呢?

从本质上讲，电镜是一种助视仪器。人类认识自然界大部分信息

来自眼睛。但是正常人眼在明视距离25cm时，只能将相距0.2mm的

两个物体分辨，小于0.2mm的物体结构细节人眼分辨不清。为了能看

到生物结构更小的细节，科学家发明了各种助视仪器，不断提高人眼

的分辨率，这些助视仪器有放大镜、望远镜、各种显微镜等。

2.电子显微镜科学主要包括三个方面的内容:

1.各种电子显微镜的设计与制造；

2.电子显微镜样品制备以及有关的各种设备；

3.电子显微镜图像的处理、分析和解释。

在生物电子显微技术中，同样是研究和解决电子显微镜应用于生

物学时这三方面的内容。

1932年他们把上述研究成果写成报告井公布于世，人们多把

1932年定为“电镜诞生年”。

1939年Ruska等在德国Siemens公司，研制并生产了第一系列

商品电镜，其分辨力为10nm，共生产了40台。1942年，M.Mullan

在剑桥大学研制成功第一台扫描电镜实验室装置；

电子显微镜的定义：它以电子束作为“光源”（电子束的波长比

可见光的波长短得多，使电镜的分辨率大幅度提高），利用电磁透镜

成象，并与一定的机械装置、电子和高真空技术相结合，所构成的现

代化、综合性精密电子光学仪器。

一、透射式电子显微镜是一种电子束透过样品而直接成像的电镜，

其电子束的加速电压一般为50～

l00kV，样品厚度1～100nm(一般为50nm左右)。

透射电子显微镜特点：

1．分辨率极高点分辨率0.2～0.3nm，晶格分辨率0.1～0.2nm。

2.放大倍数高、变化范围广：几百倍至到几十万可调。

3．制样技术以超薄切片法为主，此外还有负染法、复型法等，样

品制备比较复杂。

4．图象特点视场范围小，为二维结构平面图像。

5．应用范围广泛用于研究生物样品局部切面的超微结构，生物大

分子结构以及冷冻蚀刻复型膜上的生物膜超微结构，非生物样品的纳

米结构观察等。

二、扫描式电子显微镜

概念电子束照射在样品上，产生二次电子等信息，而后再将二次

电子等信息收集起来放大成像。扫描电镜图像实为间接成像，其加速

电压在1～30kV之间。

扫描电子显微镜特点：

1．分辨率较高一般为3～6nm，场发射式扫描电镜可达1～2nm；

放大倍数一般为20万倍，场发射式可达40万倍；放大倍率连续可调。

2．制样技术以样品表面观察法为主，此外还有冷冻割断内部结构

观察法、高分辨样品制备法及管道铸型法等；可观察大而厚的样品，

制备方法较为简单，样品的适应性较强。

3.图像特点景深长，图像层次丰富，立体感强，为三维结构图像。

4.应用范围广泛应用于生物样品表面及其断面立体形貌的观察，

并具有多种分析功能。

三、分析型电镜

(一)概念为装有扫描附件、能谱仪(EDX)和波谱仪(WDX)的透射电

镜。

(二)特点除具有透射电镜和扫描电镜性能以外，还可对样品微区内

(几个um3)的元素，进行定性、定量

综合分析。

四、超高压电镜(HVEM)

(一)概念为加速电压在500kV以上的透射电镜。目前世界上超高

压电镜的最高加速电压为3000kV；世界

此类电镜数量较少。

(二)特点

1．分辨率高电镜加速电压高，穿透力强，分辨率高，对样品损伤

小。

2．制样技术该电镜可观察厚样品(＞100nm)和含水的样品，如

利用特殊“压力样品室”，研究生活细菌和培养细胞等。

3．图像特点可观察细胞表面、内部及细胞骨架结构，还可通过

“叠加法”对图像进行立体化处理。4．应用范围可广泛应用于医学

生物学研究中厚样品、含水