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实验动物学操作采样

###一、实验动物学操作采样概述

实验动物学操作采样是指在实验过程中,从实验动物体内或体表采集生物样本(如血液、组织、尿液、粪便等),用于后续检测、分析或研究。规范的采样操作是保证实验结果准确性和可靠性的关键环节。本指南旨在提供标准化的采样流程和注意事项,确保操作安全、高效。

###二、采样前的准备

(一)采样环境

1.确保采样环境干净、整洁,避免交叉污染。

2.使用无菌操作台或生物安全柜,保持空气流通。

3.温度控制在20–25℃,湿度控制在40–60%。

(二)采样器械

1.使用一次性无菌采样工具,如采血管、注射器、剪刀、镊子等。

2.提前高压灭菌或使用酒精消毒,确保无菌性。

3.检查器械是否完好,避免破损导致样本污染。

(三)实验动物准备

1.对实验动物进行适当的麻醉或镇静,减少应激反应。

2.根据动物种类选择合适的固定方式,如俯卧位或侧卧位。

3.检查动物皮肤状态,避免破损或感染。

###三、常见采样方法

(一)血液采样

1.**颈静脉采血**

(1)在颈部后侧找到静脉,用酒精消毒皮肤。

(2)使用采血管或注射器缓慢抽取血液,避免空气进入。

(3)完成后用棉球按压止血,观察是否有血肿。

2.**股动脉采血**

(1)在腹股沟处找到动脉搏动,用酒精消毒。

(2)用注射器垂直进针,缓慢采血。

(3)用纱布按压止血,防止血肿形成。

(二)组织采样

1.**皮肤组织**

(1)用消毒剪刀剪取约1–2mm2的皮肤组织。

(2)立即放入10%中性甲醛溶液或无菌生理盐水中固定。

2.**器官组织**

(1)用无菌手术刀打开腹腔,暴露目标器官。

(2)用组织钳固定器官,用刀片取适量组织。

(3)置于4%多聚甲醛溶液中保存。

(三)尿液采样

1.**代谢笼采集**

(1)收集实验动物24小时内的尿液,避免污染。

(2)置于无菌试管中,立即进行检测或保存。

2.**导尿管采集**

(1)用无菌生理盐水冲洗导尿管。

(2)插入导尿管至膀胱,收集尿液。

(3)取出导尿管,用棉球按压会阴部。

###四、采样后的处理

(一)样本保存

1.血液样本:立即离心分离,血浆置于-20℃冷冻保存。

2.组织样本:固定后置于4℃冰箱保存,24小时内进行病理分析。

3.尿液样本:冷藏保存,48小时内完成生化检测。

(二)废弃物处理

1.无菌器械用高压灭菌后丢弃。

2.污染性样本用10%甲醛溶液浸泡30分钟后再处理。

3.保持采样区域清洁,定期消毒。

###五、注意事项

1.采样前核对实验动物信息,避免混淆。

2.操作过程中轻柔,减少动物应激。

3.若出现异常反应(如出血不止、休克),立即停止采样并报告。

4.定期检查采样工具,确保无菌状态。

5.记录采样时间、样本类型及保存条件,便于后续分析。

###一、实验动物学操作采样概述

实验动物学操作采样是指在实验过程中,从实验动物体内或体表采集生物样本(如血液、组织、尿液、粪便等),用于后续检测、分析或研究。规范的采样操作是保证实验结果准确性和可靠性的关键环节。本指南旨在提供标准化的采样流程和注意事项,确保操作安全、高效。

###二、采样前的准备

(一)采样环境

1.确保采样环境干净、整洁,避免交叉污染。应选择专门的采样区域,地面和台面应易于清洁和消毒。使用一次性脚垫或脚踏消毒器进入采样区,减少人员带入的微生物。

2.使用无菌操作台或生物安全柜,保持空气流通。操作台应定期进行紫外线消毒和日常清洁,确保滤网功能正常。生物安全柜应定期进行性能检测(如风速、过滤效率),确保运行在最佳状态。

3.温度控制在20–25℃,湿度控制在40–60%。过高的温度和湿度可能促进微生物生长,而过低的温度可能导致某些样本(如尿液)结晶。

(二)采样器械

1.使用一次性无菌采样工具,如采血管(分为血清管、血浆管、肝素管等,需根据检测需求选择)、注射器(不同规格,如1mL、5mL)、酒精棉球、生理盐水注射器、消毒剪刀、无菌镊子、止血钳、组织钳、手术刀、标本袋或试管架等。所有器械在使用前均需确认包装完好且在有效期内。

2.提前高压灭菌(通常设置121℃,灭菌时间15–20分钟)或使用酒精/碘伏等消毒剂进行表面消毒。金属器械首选高压灭菌,塑料或玻璃制品可考虑使用环氧乙烷灭菌。消毒后器械应置于无菌包装中,避免二次污染。

3.检查器械是否完好,避免破损导致样本污染。例如,采血管是否有裂痕,注射器是否有气泡,针头是否锋利且无弯曲。

(三)实验动物准备

1.对实验动物进行适当的麻醉或镇静,减少应激反应。根据动物种类(如小鼠、大鼠、兔子、豚鼠等)和采样方法选择合适的麻醉剂(如吸入性麻醉剂异氟烷、地西泮等)和剂量。麻醉深度需适中

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