微小细菌和节杆菌互作氧化锰机理与污染物降解研究.pdfVIP

摘要

锰氧化微生物能催化氧化Mn（Ⅱ）生成锰氧化物Mn（ⅢⅣ），且生成的

锰氧化物对水体中污染物有较强的氧化吸附能力，因而受到广泛研究。以往对

锰氧化微生物的研究主要针对单株锰氧化菌，而对微生物相互作用导致的Mn

（Ⅱ）氧化过程缺乏深入研究。近些年研究发现的微小细菌（直径0.45μm）在

自然界中广泛分布。微小细菌因其基因组通常较小，往往缺乏完整的必需物质

的生物合成途径，因此倾向于通过与其他微生物交互作用以提高生存能力。据

此，我们探究微小细菌与其他菌株互作产生锰氧化活性的能力，以此揭示微生

物互作在锰氧化活性产生中的潜在作用，为利用微生物互作锰氧化消减污染物

提供理论支撑。

本研究以实验室前期发现的一株携带Mn（Ⅱ）氧化基因（boxA）但单独培

养时不表现Mn（Ⅱ）氧化活性的节杆菌（Arthrobactersp.QXT-31）为研究对象，

考察环境中是否存在微小细菌能触发其产生锰氧化活性。从土壤分离得到4株

能触发节杆菌产生Mn（Ⅱ）氧化活性的微小细菌，菌株鉴定结果其中2株能过

0.22μm孔径的微小细菌属于窄食单胞菌属（Stenotrophomonas），另外2株可

过0.45μm孔径的微小细菌分别属于戴氏菌属（Dyella）和鞘氨醇单胞菌属

（Sphingomonas），并进一步探索了双菌比例和pH对互作菌系锰氧化活性的影

响规律。

通过组合培养实验，考察了微小细菌和节杆菌互作产生Mn（Ⅱ）氧化活性

的互作方式。研究发现四个互作菌系中Mn（Ⅱ）氧化活性的产生需要双菌活细

胞的直接接触，单菌的外泌物或粗提液均不能使另一株菌产生Mn（Ⅱ）氧化活

性。互作菌系中产生的锰氧化活性包括Mn（Ⅱ）氧化蛋白和超氧自由基，因此

锰氧化机理为酶的直接催化氧化和生物源超氧自由基的化学氧化。互作菌系中

基于RNA-seq技术的转录组分析结果显示节杆菌中的Mn（Ⅱ）氧化基因boxA

在混合培养开始时处于静默状态，而后被触发转录；基于转录丰度的功能富集

分析显示互作菌的Ⅱ型分泌系统转录水平上调，可能通过外泌毒力蛋白参与互

作。

进一步考察了在实际环境中互作菌系氧化Mn（Ⅱ）能否发生。将节杆菌、

互作菌、双菌分别接种到土壤样品悬浮液中培养，研究结果表明四个互作菌系

均能在土壤样品悬浮液中氧化Mn（Ⅱ），且和对照组（土壤样品培养液）相比，

只接种节杆菌或微小细菌的体系也能提高土壤样品的锰氧化活性，表明微生物

种间互作锰氧化现象具有一定的普遍性。此外发现，互作菌系可以通过强化生

成锰氧化物从而促进磺胺甲恶唑和土霉素的降解，相比不发生锰氧化的互作菌

系，降解率提高了3-6倍，该研究结果表明基于微生物互作可强化污染物降解。

综上，本研究分离得到四株能和节杆菌互作氧化Mn（Ⅱ）微小细菌，考察

了互作菌系产生Mn（Ⅱ）氧化活性的互作方式及互作机理，对今后深入研究微

小细菌参与的微生物种间互作Mn（Ⅱ）氧化过程及其调控机制具有指导意义。

同时，本研究还探索了实际环境中微生物互作氧化锰的可能性以及互作菌系生

成的生物锰氧化物在抗生素降解中的应用潜力，为开发基于微生物互作的新型

污染物降解技术提供了新思路。

关键词:微小细菌；节杆菌；种间相互作用；锰氧化

Abstract

Manganese-oxidizingmicroorganismscancatalyzetheoxidationofMn(II)to

producemanganeseoxidesMn(IIIIV),andthemanganeseoxidesgeneratedhave

strongoxidizingadsor