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2025年分子检验技术试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共40分）

1.关于聚合酶链式反应（PCR）的引物设计，以下描述错误的是：

A.引物长度通常为18-25个核苷酸

B.引物GC含量应控制在40%-60%

C.3’端避免连续3个G或C

D.引物间可形成≥3个碱基的互补配对

答案：D（引物间互补易导致引物二聚体，应避免）

2.检测样本中低丰度RNA病毒（如早期HIV）时，优先选择的技术是：

A.普通PCR

B.实时荧光定量PCR（qPCR）

C.环介导等温扩增（LAMP）

D.数字PCR（dPCR）

答案：D（dPCR通过单分子扩增，可检测极低拷贝数靶标）

3.以下哪种突变类型不属于单核苷酸多态性（SNP）？

A.C→T的点突变

B.3个碱基的插入

C.G→A的颠换

D.A→G的转换

答案：B（SNP为单碱基变异，插入3个碱基属于插入突变）

4.下一代测序（NGS）中，用于评估测序数据质量的关键指标是：

A.测序深度

B.读长（ReadLength）

C.Q30值

D.比对率

答案：C（Q30表示测序错误率≤0.1%，是评估数据可靠性的核心指标）

5.Southernblot技术的主要检测对象是：

A.蛋白质

B.信使RNA（mRNA）

C.脱氧核糖核酸（DNA）

D.微小RNA（miRNA）

答案：C（Southernblot用于DNA片段的检测与分析）

6.探针标记技术中，生物素标记的探针可通过哪种物质进行检测？

A.荧光素异硫氰酸酯（FITC）

B.链霉亲和素-辣根过氧化物酶（SA-HRP）

C.地高辛抗体

D.量子点

答案：B（生物素与链霉亲和素高亲和力结合，可偶联酶或荧光基团）

7.反转录PCR（RT-PCR）的模板是：

A.基因组DNA

B.总RNA

C.环状DNA（circDNA）

D.线粒体DNA

答案：B（RT-PCR通过反转录将RNA转化为cDNA后扩增）

8.限制性内切酶EcoRⅠ的识别序列为GAATTC，其切割位点位于：

A.G和A之间

B.A和A之间

C.A和T之间

D.T和C之间

答案：A（EcoRⅠ切割GAATTC中的G↓AATTC）

9.检测DNA甲基化最常用的预处理方法是：

A.亚硫酸氢盐处理

B.限制性酶切

C.超声破碎

D.热变性

答案：A（亚硫酸氢盐可将未甲基化的胞嘧啶（C）转化为尿嘧啶（U），甲基化C保持不变）

10.CRISPR-Cas9系统中，引导Cas9蛋白靶向切割DNA的关键分子是：

A.tracrRNA

B.crRNA

C.sgRNA（单链引导RNA）

D.mRNA

答案：C（sgRNA由tracrRNA和crRNA融合而成，决定靶向特异性）

11.实时荧光定量PCR中，SYBRGreenⅠ染料的作用是：

A.特异性结合目标DNA

B.嵌入双链DNA发出荧光

C.标记引物5’端

D.终止DNA链延伸

答案：B（SYBRGreenⅠ非特异性嵌入双链DNA，荧光强度与扩增产物量正相关）

12.以下哪种技术可实现单分子水平的DNA测序？

A.焦磷酸测序（Pyrosequencing）

B.纳米孔测序（NanoporeSequencing）

C.边合成边测序（SBS）

D.连接酶测序（SOLiD）

答案：B（纳米孔技术通过检测DNA链通过纳米孔时的电流变化，直接读取单分子序列）

13.检测融合基因（如BCR-ABL）时，首选的分子检验方法是：

A.荧光原位杂交（FISH）

B.多重PCR

C.基因芯片

D.全外显子测序（WES）

答案：A（FISH可在细胞原位检测染色体结构异常，直观显示融合信号）

14.数字PCR与实时荧光定量PCR的主要区别在于：

A.是否需要标准曲线

B.是否使用荧光染料

C.是否进行温度循环

D.是否检测终点信号

答案：A（dPCR通过微滴分割实现绝对定量，无需标准曲线；qPCR依赖标准曲线相对定量）

15.用于检测微小残留病灶（MRD）的分子技术需满足的关键性能是：

A.高灵敏度（10??~10??）

B.高特异性（99%）

C.高通量

D.低成本

答案：A（MRD检测需识别极少量异常细胞，灵敏度要求显著高于常规检测）

16.以下哪种