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2026年博士技能操作考试题目及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.以下哪种实验技术常用于蛋白质分离纯化？

A.凝胶过滤层析B.核酸电泳C.细胞培养D.基因克隆

答案：A

2.以下哪种仪器用于精确测量溶液体积？

A.量筒B.移液枪C.烧杯D.容量瓶

答案：B

3.基因编辑技术CRISPR/Cas9中的Cas9蛋白作用是？

A.识别目标DNA序列B.切割DNAC.连接DNAD.转录DNA

答案：B

4.细胞培养中常用的血清是？

A.人血清B.兔血清C.胎牛血清D.羊血清

答案：C

5.蛋白质定量分析常用的方法是？

A.凯氏定氮法B.紫外分光光度法C.Bradford法D.以上都是

答案：D

6.进行Westernblot实验时，转膜的目的是？

A.将蛋白质转移到膜上B.将核酸转移到膜上C.固定细胞D.清洗蛋白质

答案：A

7.以下哪种酶用于cDNA合成？

A.DNA聚合酶B.逆转录酶C.限制性内切酶D.连接酶

答案：B

8.微生物培养常用的培养基是？

A.LB培养基B.麦康凯培养基C.伊红美蓝培养基D.营养琼脂培养基

答案：A

9.荧光定量PCR技术的主要作用是？

A.扩增DNAB.检测基因表达量C.分析基因序列D.克隆基因

答案：B

10.进行细胞传代时，常用的消化液是？

A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.胶原蛋白酶D.纤维素酶

答案：A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.以下属于分子生物学实验技术的有（）

A.PCR技术B.SouthernblotC.蛋白质测序D.细胞融合

答案：ABC

2.细胞培养的基本条件包括（）

A.合适的培养基B.适宜的温度C.无菌环境D.充足的光照

答案：ABC

3.蛋白质分离纯化的方法有（）

A.离子交换层析B.亲和层析C.凝胶过滤层析D.等密度离心

答案：ABC

4.基因克隆的基本步骤包括（）

A.目的基因获取B.载体构建C.转化D.筛选鉴定

答案：ABCD

5.以下哪些是常用的生物信息学数据库（）

A.GenBankB.PDBC.Swiss-ProtD.NCBI

答案：ABC

6.微生物鉴定的方法有（）

A.形态学观察B.生理生化特性检测C.16SrRNA测序D.药敏试验

答案：ABC

7.细胞工程技术包括（）

A.细胞培养B.细胞融合C.细胞核移植D.基因编辑

答案：ABC

8.以下属于酶的固定化方法的有（）

A.吸附法B.交联法C.包埋法D.共价结合法

答案：ABCD

9.蛋白质结构分析的技术有（）

A.X射线晶体学B.核磁共振C.冷冻电镜D.圆二色光谱

答案：ABCD

10.常用的核酸提取方法有（）

A.酚氯仿抽提法B.硅胶柱法C.磁珠法D.离子交换法

答案：ABC

三、判断题（每题2分，共10题）

1.所有细胞培养都需要添加抗生素防止污染。（×）

2.PCR反应中引物的作用是引导DNA合成的起始。（√）

3.蛋白质的等电点是指蛋白质在电场中不移动时的pH值。（√）

4.基因敲除是将目标基因完全删除。（×）

5.微生物发酵过程中温度对发酵结果没有影响。（×）

6.细胞凋亡和细胞坏死是同一概念。（×）

7.凝胶过滤层析中分子量大的蛋白质先被洗脱下来。（√）

8.荧光定量PCR可以直接测定基因的序列。（×）

9.蛋白质测序可以确定蛋白质的一级结构。（√）

10.进行动物细胞培养时，CO?培养箱的作用主要是维持细胞的渗透压。（×）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR技术的基本原理。

答案：PCR以拟扩增的DNA为模板，加入引物、dNTP、Taq酶等。经过变性、退火、延伸三个步骤循环，使特定DNA片段呈指数级扩增。变性使DNA双链解开，退火让引物与模板结合，延伸由Taq酶催化合成新的DNA链。

2.细胞培养过程中如何防止污染？

答案：保持操作环境无菌，如超净台定期消毒；所用器材、试剂严格灭菌；操作人员规范操作，做好个人防护；定期观察细胞状态，一旦发现污染及时处理，废弃污染细胞及相关器材。

3.简述蛋白质分离纯化的一般流程。

答案：先进行样