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宠物基因鉴定实验操作考试题中级

一、选择题（每题2分，共20题）

1.在宠物基因鉴定实验中，用于DNA提取的试剂盒应优先选择哪种缓冲液系统？

A.高盐缓冲液

B.低盐缓冲液

C.中性缓冲液

D.高pH缓冲液

2.PCR扩增过程中，引物退火温度一般取决于引物的？

A.长度

B.GC含量

C.碱基组成

D.以上都是

3.以下哪种方法常用于检测PCR产物特异性？

A.电泳分析

B.荧光定量分析

C.测序验证

D.酶切验证

4.宠物基因鉴定中，SNP（单核苷酸多态性）分析最常用于？

A.品种鉴定

B.亲子鉴定

C.疾病筛查

D.以上都是

5.琼脂糖凝胶电泳时，DNA片段迁移速度与？

A.片段大小成正比

B.片段大小成反比

C.电压成正比

D.电解质浓度成正比

6.PCR反应体系中，dNTPs的作用是？

A.引物结合

B.延伸模板

C.调节退火温度

D.激活DNA聚合酶

7.宠物基因分型中，微卫星标记（STR）的优势在于？

A.高等位基因频率

B.快速检测

C.多态性丰富

D.以上都是

8.基因测序中，Sanger测序法的基本原理是？

A.连锁反应

B.聚合酶链式反应

C.末端终止法

D.电泳分离

9.在宠物基因鉴定实验中，DNA污染的主要来源是？

A.试剂污染

B.操作人员污染

C.设备污染

D.以上都是

10.亲子鉴定中，用于计算亲缘关系的指标是？

A.相似度系数

B.系数亲缘

C.杂合度

D.基因频率

二、填空题（每空1分，共10空）

1.PCR反应体系通常包含______、______、______、______和______。

2.琼脂糖凝胶电泳中，DNA片段大小通过______进行估算。

3.SNP分析中，基因型检测常用的方法有______和______。

4.宠物基因鉴定中，STR分型常用于______和______。

5.DNA提取过程中，常用的裂解方法有______、______和______。

6.基因测序中，Sanger法的基本步骤包括______、______、______和______。

7.亲子鉴定中，计算亲缘关系时，需要考虑______和______。

8.PCR产物验证常用的方法有______、______和______。

9.宠物基因鉴定中，常见的基因检测技术有______、______和______。

10.DNA污染的检测方法包括______、______和______。

三、简答题（每题5分，共5题）

1.简述PCR反应的基本原理及其关键步骤。

2.解释SNP检测在宠物品种鉴定中的应用价值。

3.简述DNA提取的原理和常用方法。

4.说明亲子鉴定中，如何通过基因分型计算亲缘关系？

5.列举PCR产物验证的常见方法，并简述其原理。

四、实验设计题（每题10分，共2题）

1.设计一个实验方案，用于鉴定某只犬是否为藏獒纯种。

要求：说明所需检测的基因位点、实验步骤和预期结果。

2.设计一个实验方案，用于检测某只猫是否携带猫艾滋病毒（FIV）基因。

要求：说明所需检测的基因片段、实验步骤和预期结果。

五、论述题（每题15分，共2题）

1.论述DNA污染对宠物基因鉴定实验的影响及预防措施。

2.论述STR分型在宠物个体识别中的应用现状及未来发展趋势。

答案与解析

一、选择题答案与解析

1.D

解析：高pH缓冲液（如Tris-EDTA）能更好地保护DNA免受降解，适合宠物样本的多样性。

2.D

解析：引物长度、GC含量和碱基组成都会影响退火温度，需综合优化。

3.C

解析：测序验证能精确比对PCR产物与目标基因的一致性，排除非特异性扩增。

4.D

解析：SNP可用于品种鉴定（如犬种）、亲子鉴定（如猫科动物）和疾病筛查（如遗传病）。

5.B

解析：DNA片段在凝胶中迁移速度与其长度成反比，凝胶孔径越小，短片段迁移越快。

6.B

解析：dNTPs是DNA合成的原料，提供A、T、C、G四种碱基供延伸使用。

7.D

解析：STR分型具有高多态性、快速检测和广泛适用性，常用于个体识别。

8.C

解析：Sanger测序法通过链终止子（ddNTPs）区分延伸产物，实现序列测定。

9.D

解析：试剂、人员和设备都可能引入DNA污染，需严格操作和消毒。

10.A

解析：相似度系数是亲子鉴定中常用的亲缘关系计算指标，反映基因共享程度。

二、填空题答案与解析

1.模板DNA、引物、dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液

解析：PCR反应必需的五大组分，缺一不可。

2.Marker（基因对照带）

解析：Marker提供已知片段大小的