高效液相色谱系统组成详解.pptxVIP

高效液相色谱组成

液相色谱工作流程

工作站输液泵进样器柱温箱（色谱柱）检测器01OPTION02OPTION03OPTION04OPTION05OPTION目录CATALOG

PART01输液泵负责输送流动相，并且推动整个系统的运行

等度洗脱梯度洗脱单元泵高压二元泵低压四元泵泵的类型及梯度洗脱

泵的工作示意图

高压二元泵高压二元泵工作方式：双泵并联，可同时有两个流动相，按照预先设定的配比进入，再高压下进行混合，混合配比更准确，不易产生气泡。

低压四元泵低压四元泵工作方式：最多可同时有四个流动相进入流路，按照预先设定的配比进行混合，由于在常压下混合所以较易产生气泡，需配合在线脱气。

等度洗脱和梯度洗脱等度洗脱：流动相为单一或者混合溶剂，整个分析过程中流动相不变。

等度洗脱和梯度洗脱梯度洗脱：在一个分析周期中使用的流动相会随时间的变化按一定程序梯度变化，可以缩短分离时间，改善分离度与峰形。

等度洗脱和梯度洗脱洗脱效果等度洗脱梯度洗脱

PART02进样器负责将样品送入系统

文字标题内容手动进样器自动进样器由定子和转子组成的六通阀，通过手动切换进样器，实现在高压状态下用手推动进样针进样，重复性好，进样量准确。自动进样器是由计算机自动控制取样、进样、复位、管路清洗等，从机械设计上增加重复性和进样准确性，低残留。进样器

进样器

PART03柱温箱（色谱柱）柱温箱控制色谱柱温度，色谱柱是HPLC的“心脏”

色谱柱结构塑料堵头柱头螺丝滤帽（含筛板）柱管填料

PART04检测器负责采集信号，记录数据信息

检测器UV-VISMSDELSDDADFLDRID检测器

紫外检测器（UV-VIS）基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收。选择性检测器，只适用于测定有紫外吸收的物质。1.对温度和流速不敏感2.可用于梯度洗脱3.灵敏度较高可用于ng级检测大多数化合物都有一定程度的吸光度，目前实验室使用最多，约50%以上。原理缺点优点应用

光电二极管矩阵检测器（DAD）基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收。选择性检测器，只适用于测定有紫外吸收的物质。1.对温度和流速不敏感2.可用于梯度洗脱3.灵敏度较高可用于ng级检测1.一种三维水平的吸光度检测器-采集三维图谱2.兼顾紫外检测器及可见分光光度计的信息3.在收集色谱图的同时，得到光谱图，市场占比约25%原理缺点优点应用

荧光检测器（FLD）发荧光的化合物吸光（UV或VIS）使其分子达到激发态，当其返回基态时发射光的现象即荧光。不是所有的化合物都有荧光，必要时需要衍生。灵敏度较高可用于pg级检测1.环境中的污染物-于多环芳烃、多酚等2.食品、饮料-黄曲霉毒素、染料、维生素及衍生氨基酸3.生物技术及制药原理缺点优点应用

示差折光检测器（RID）连续测定流通池中溶液折射率来测定试样各组分浓度。1.对温度变化敏感2.不能用于梯度检测3.灵敏度低，ug级检测通用性检测器，只要被测组分与流动相的折光指数有差别就可检测，对于糖类物质灵敏度高。1.几乎适用于所有化合物的检测，特别适用没有紫外吸收的化合物，如：糖类、脂类及脂肪酸等2.高分子化合物GPC/GFC分析原理缺点优点应用

蒸发光散射检测器（ELSD）将柱洗脱液雾化形成气溶胶，然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发，最后余下的不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中检测1.使用不便，需要配置高压氮气或空气，且实验室中产生废气有害。2.不能使用不挥发性流动相。1.通用性检测器，可检测不含发色团的化合物。2.流动相低温雾化和蒸发，对热不稳定和挥发性化合物有较高的灵敏度。3.广泛的梯度和溶剂兼容性，无溶剂峰干扰。适用于检测碳水化合物、油脂及脂肪酸、未衍生的氨基酸、表面活性剂、天然产物等。原理缺点优点应用

质谱检测器（MSD）将柱洗脱液雾化形成气溶胶，然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发，最后余下的不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中检测1.使用不便，需要配置高压氮气或空气，且实验室中产生废气有害。2.不能使用不挥发性流动相。1.通用性检测器，可检测不含发色团的化合物。2.流动相低温雾化和蒸发，对热不稳定和挥发性化合物有较高的灵敏度。3.广泛的梯度和溶剂兼容性，无溶剂峰干扰。适用于检测碳水化合物、油脂及脂肪酸、未衍生的氨基酸、表面活性剂、天然产物等。原理缺点优点应用

PART05工作站方法设置、图谱处理中心

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