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显微镜操作实训指导与试题

引言

显微镜是生命科学、医学、材料科学等领域不可或缺的基础观察工具。熟练掌握显微镜的规范操作方法，不仅是获取准确实验结果的前提，也是保障仪器设备安全、延长其使用寿命的关键。本实训指导旨在系统阐述显微镜的基本构造、操作流程、注意事项及维护保养知识，并辅以针对性试题，帮助实训者全面掌握显微镜操作技能，培养严谨的科学态度和规范的实验习惯。

第一部分：显微镜操作实训指导

一、显微镜的基本构造认知

在进行操作前，首先需熟悉所使用显微镜的主要构造及其功能。一般光学显微镜主要由以下部分组成：

1.机械部分：

*镜座：显微镜的基座，起稳定和支撑作用。

*镜柱：连接镜座与镜臂，支撑上部结构。

*镜臂：手持显微镜时的握部，也是连接镜筒与镜柱的部件。

*载物台：放置玻片标本的平台，中央有通光孔，台上通常装有玻片夹或标本移动器，后者可精确控制标本的前后左右移动。

*镜筒：连接目镜与物镜转换器，光线由此通过。

*物镜转换器：位于镜筒下端，可旋转，用于安装和转换不同放大倍数的物镜。

*粗准焦螺旋：大幅度调节镜筒（或载物台）的升降，用于初步找到物像。

*细准焦螺旋：小幅度调节镜筒（或载物台）的升降，用于精确对焦，使物像清晰。

2.光学部分：

*目镜：位于镜筒上端，通常标有放大倍数（如5×,10×,15×）。

*物镜：安装在物镜转换器上，是显微镜的核心部件，通常有低倍镜（如4×,10×）、高倍镜（如40×,45×）和油镜（如100×）。物镜上通常标有放大倍数、数值孔径（NA）以及工作距离等参数。

*反光镜/光源：位于载物台下方，用于将光线反射到通光孔。反光镜一面为平面镜（强光时用），一面为凹面镜（弱光时用）。现代显微镜多配备内置电光源和亮度调节旋钮。

*遮光器/光圈：位于载物台下方的聚光器上（或直接集成在载物台下方），由多个大小不同的光圈组成，用于调节通过通光孔的光量。

二、操作流程与步骤

（一）准备与检查

1.环境准备：将显微镜放置在平稳、清洁、光线适宜的实验台面上，远离水源、火源及腐蚀性物质。操作者坐姿端正，两眼自然睁开。

2.仪器检查：检查显微镜各部件是否完好，镜头是否清洁，镜臂是否稳固，准焦螺旋转动是否顺畅。如有异常，及时报告教师。

（二）取镜与安放

*（若从显微镜柜中取出）一手握住镜臂，另一手托住镜座，将显微镜平稳取出，放置在实验台距边缘约一手掌宽的位置，略偏左（便于左眼观察，右眼同时绘图或记录）。

（三）对光

1.转动转换器：使低倍物镜（通常是10×或4×，镜头最短或其上标有“低倍”字样）对准载物台中央的通光孔（可听到轻微的“咔哒”声，表示物镜已卡紧）。

2.调节光圈：打开光圈（或选择较大光圈）。

3.调节反光镜/光源：若为自然光，用反光镜的凹面镜（光线较弱时）或平面镜（光线较强时）对准光源，同时左眼注视目镜内（右眼睁开），直至视野内呈现明亮均匀的圆形光斑。若为内置光源显微镜，打开电源开关，调节亮度旋钮至视野明亮均匀。

（四）放置玻片标本

1.将待观察的玻片标本放在载物台上，用玻片夹（或标本移动器的固定装置）固定好，确保标本正对通光孔的中心。

（五）低倍物镜观察（核心步骤）

1.下降镜筒：转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，或载物台缓缓上升（根据显微镜类型而定），直至低倍物镜镜头接近玻片标本（距离约0.5-1厘米，或通过目镜观察时能看到模糊物像为止）。注意：此时眼睛应从侧面注视物镜与玻片之间的距离，防止物镜镜头压碎玻片标本或损坏镜头。

2.寻找物像：左眼注视目镜内，同时缓慢反向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，或载物台缓缓下降，直至视野中出现清晰的物像。如果物像不清晰，可略微转动细准焦螺旋进行调节。

3.调整观察对象位置：如需观察标本的不同部位，可通过移动玻片标本（或调节标本移动器的旋钮），将目标区域移至视野中央。

（六）高倍物镜观察

1.定位目标：在低倍镜下，将需要进一步放大观察的目标移至视野正中央。

2.转换高倍物镜：直接转动转换器，将高倍物镜对准通光孔。注意：转换物镜时动作要轻缓，避免镜头碰撞玻片。由于显微镜设计有“齐焦”性能，转换后物像一般会在视野内，但可能不够清晰。

3.调焦：左眼注视目镜，此时严禁转动粗准焦螺旋！只能轻轻转动细准焦螺旋，直至物像清晰。

4.调节亮度：转换至高倍镜后，视野可能会变暗。可通过开大光圈、上调光源亮度或换用反光镜的凹面镜来增加视野亮度。

（七）油镜的使用（若配备）

1.前提：需在高倍镜下将待观察的细微结构移至视野中央，并将高倍物镜转开。

2.滴加香柏油：在玻片标本的观察部位（正对通