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高效病理技术操作流程规范

一、总则

病理技术工作是病理诊断的基石，其操作的规范性、准确性与高效性直接关系到病理诊断报告的质量与时效，进而影响临床诊疗决策。为标准化病理技术操作流程，提高工作效率，确保检验结果的可靠性与重复性，特制定本规范。本规范适用于病理科技术室日常组织标本处理的各项操作，全体技术人员必须严格遵照执行。

二、标本接收与验收

1.接收核对：接收标本时，需仔细核对送检申请单与标本容器上的信息，确保患者姓名、性别、年龄、标本来源、送检科室等关键信息完全一致。检查标本容器是否完好，有无渗漏、破损。

2.标本状态评估：观察标本类型、大小、数量是否与申请单描述相符。对于手术切除标本，注意有无必要的标记（如切缘、区域淋巴结分组等）。对于小标本，确认固定液种类及量是否适宜（固定液量应为标本体积的数倍以上）。

3.签收记录：核对无误后，在标本接收登记本或信息系统中准确记录接收时间、标本状态、接收人等信息，并在申请单上签字确认。对于不合格标本（如信息不全、未固定、标本腐败等），应及时与送检科室沟通，按相关规定处理并记录。

三、标本的固定与取材

1.固定处理：

*固定液选择：常规标本采用中性缓冲福尔马林固定液。特殊标本（如肾穿刺、某些电镜标本）需按特定要求选择固定液。

*固定要求：标本应尽快放入固定液，避免自溶。大标本应及时切开，保证固定液充分渗透。固定时间应充足，一般为组织块厚度的数十倍小时，但亦不宜过长。

2.取材操作：

*取材前准备：穿戴好个人防护用品，准备好取材工具（刀、剪、镊、量尺、标本盘等），确保清洁无污染。

*标本描述：详细观察并记录标本的大小、形状、颜色、质地、表面及切面情况，有无结节、溃疡、出血、坏死等病变。

*组织块选取：遵循“代表性、全面性、规范性”原则。选取病变与正常组织交界处、典型病变区、不同颜色质地区域、可疑病灶及重要解剖结构（如肿瘤切缘）。组织块大小、厚度应适中，以利于后续处理。

*编号与记录：切取的组织块应妥善编号，与蜡块编号一一对应，并在取材记录单上详细描述组织块的部位及数量。

四、组织脱水、透明与浸蜡

1.脱水：将组织块依次放入不同浓度梯度的脱水剂（如乙醇）中，逐步脱去组织内水分。严格控制各梯度脱水剂的更换频率及脱水时间，确保脱水彻底且不过度。

2.透明：脱水后的组织块移入透明剂（如二甲苯）中，使组织透明，利于石蜡浸透。透明时间应根据组织大小和透明剂新鲜度调整，避免透明不足或过度。

3.浸蜡：透明后的组织块置于融化的石蜡中，使石蜡取代透明剂渗入组织内部。浸蜡用石蜡应保持清洁，熔点适宜。浸蜡时间需足够，确保石蜡充分浸透组织。整个脱水、透明、浸蜡过程应在恒温设备中进行，温度控制精确。

五、包埋

1.准备工作：检查包埋框与底模是否匹配、洁净。核对组织块编号与包埋盒编号，确保无误。

2.包埋操作：将融化的石蜡倒入包埋盒内，迅速放入组织块，调整组织块的切面方向，使其平整朝下。待石蜡初步凝固后，置于冷台上加速冷却。

3.质量要求：包埋后的蜡块应组织定位准确，无气泡、无裂痕，标签清晰牢固，与原始记录信息一致。

六、切片与捞片

1.切片前准备：将蜡块固定于切片机上，根据组织类型和观察需求调整切片厚度。安装锋利的切片刀片，检查切片机运行是否正常。

2.切片操作：匀速转动切片机手轮，切取完整、平整、无褶皱的组织切片。切片厚度一般为几微米。

3.捞片：将切好的组织切片轻轻放入温水中展平，然后用洁净的载玻片将其捞起，使组织片平整附着于载玻片中央。捞片时注意水温控制，避免组织细胞损伤。

4.标记与烘烤：捞片后立即在载玻片上标记蜡块编号。将附有组织切片的载玻片置于烤片机上烘烤，使组织与载玻片牢固黏附，同时去除水分。

七、苏木素-伊红（HE）染色

1.染色前处理：将烤好的切片依次放入脱蜡剂中脱蜡至水，确保脱蜡彻底。

2.苏木素染色：将切片浸入苏木素染液中，染色时间根据染液新旧、切片厚度及室温调整，使细胞核着色清晰。

3.分化与返蓝：染色后用分化液处理，去除胞质及背景的非特异性着色，然后用返蓝液使细胞核蓝化。

4.伊红染色：将切片浸入伊红染液中，使细胞质着色。

5.脱水、透明与封片：染色后的切片依次经不同浓度乙醇脱水，二甲苯透明，最后用中性树胶或合成封片剂封片，加盖盖玻片。封片时应避免产生气泡，盖玻片与载玻片边缘应整齐。

八、切片质量控制与初检

1.质量评估：染色完成后，技术人员应对切片进行初步质量检查。观察切片是否完整、平整，有无褶皱、破损；组织细胞核与细胞质着色是否清晰，对比是否鲜明；有无污染、杂质；标签信息是否清晰、准确。

2.问题处理：对于不合格切片，应分析原因并及时进行返工处理，如重新切片、重新染