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微生物检验样本保存规范

**一、总则**

微生物检验样本的保存是确保检验结果准确性和可靠性的关键环节。规范的样本保存能够防止微生物污染、变异或死亡，从而保证检验数据的有效性。本规范旨在提供样本采集后至实验室检验前的标准化保存方法，适用于临床、环境、食品、药品等各类微生物检验场景。

**二、样本保存的基本原则**

（一）**及时性原则**

1.样本采集后应尽快处理，避免放置时间过长导致微生物活性变化。

2.不同样本类型的保存时限见下表：

|样本类型|常规保存时限|特殊保存条件|

|----------------|--------------|--------------------|

|临床标本（痰液）|4-6小时|冷藏（2-8℃）|

|食品样本（肉类）|24小时|冷藏或冷冻（≤-20℃）|

|环境样本（水样）|2-4小时|冰浴或冷藏（≤4℃）|

（二）**避免污染原则**

1.采集工具需无菌，避免二次污染。

2.样本容器应密封，防止空气中杂菌进入。

（三）**温度控制原则**

1.冷藏（2-8℃）适用于大多数临床和部分环境样本，可抑制微生物生长。

2.冷冻（≤-20℃）适用于需长期保存或对温度敏感的样本（如某些病毒）。

**三、各类样本的保存方法**

（一）临床样本保存

1.**呼吸道样本（痰液、鼻拭子）**

（1）使用无菌采样容器，加入专用保存液（如含中和剂或生理盐水）。

（2）采集后立即密封，冷藏保存，24小时内送检。

（3）若需长期保存，可加入固定剂（如10%甲醛溶液）并冷冻。

2.**尿液样本**

（1）采集后需在2小时内送检，避免沉淀物形成。

（2）若无法及时送检，可冷藏保存，但需在24小时内完成检测。

（二）食品与农产品样本保存

1.**固体样本（肉类、蔬菜）**

（1）采集后用无菌纱布包裹，放入无菌袋中，排出空气后冷藏保存。

（2）送检前避免反复解冻，冷冻样本需在-20℃保存。

2.**液体样本（乳制品、饮料）**

（1）使用无菌容器直接采集，密封冷藏（≤4℃）。

（2）检测前避免剧烈摇晃，防止微生物气溶胶产生。

（三）环境样本保存

1.**水样**

（1）采集后立即加入无菌保存剂（如氯仿或甲醛），密封冷藏。

（2）检测前需充分混匀，避免悬浮颗粒沉降。

2.**土壤样本**

（1）取表层土壤放入无菌袋，尽快送检或冷藏保存。

（2）冷冻保存时需避免反复冻融，影响微生物活性。

**四、样本保存的注意事项**

（一）**容器选择**

1.使用一次性无菌采样容器，材质需耐受目标保存温度（如PP材质适用于冷冻，玻璃/塑料适用于冷藏）。

2.密封性需检测，防止保存液挥发或外界污染。

（二）**保存设备**

1.冷藏设备需定期校准温度，确保维持在2-8℃范围内。

2.冷冻设备应避免频繁开关门，防止温度波动。

（三）**运输要求**

1.临床样本需使用保温箱（2-8℃）运输，避免长时间暴露于室温。

2.冷冻样本需使用干冰或专用冷冻箱（≤-20℃），确保运输过程中温度稳定。

**五、样本保存的异常处理**

（一）若样本保存超过规定时限，需记录原因并重新采集或直接废弃。

（二）发现样本容器破损或保存液变色（如培养基发霉），立即停止检测并报告。

（三）冷藏/冷冻设备故障时，优先采用备用设备，并记录设备维护日志。

**六、总结**

规范的样本保存是微生物检验的基础保障。操作人员需严格遵循温度、时效、容器等要求，避免因保存不当导致检验结果偏差。定期审核保存流程，结合实验室实际情况优化保存方案，可进一步提升检验质量。

**三、各类样本的保存方法（续）**

（一）临床样本保存（续）

1.**血液样本（培养、分子检测）**

（1）**采集要求**：使用无菌血培养瓶（含专用培养液），采集量需满足检测需求（通常成人静脉血5-10ml）。采血后立即颠倒混匀至少10次，确保培养液与血液充分接触。

（2）**保存条件**：

-**普通培养**：室温（15-25℃）保存，4小时内送检。

-**需氧培养**：室温放置，但需避免阳光直射。

-**厌氧培养**：立即置入厌氧罐（如GasPak系统），室温保存，24小时内送检。

（3）**冷冻保存（用于特殊检测）**：

-将血培养瓶置于-80℃，保存时间不超过1年。

-解冻时需在37℃水浴中缓慢融化，避免剧烈摇晃。

2.**粪便样本（病原学检测）**

（1）**采集工具**：使用无菌粪便容器，避免接触尿液和黏膜。

（2）**保存液选择**：

-**常规检测**：生理盐水或磷酸盐缓冲液（pH7.2-7.4）。

-**寄生虫检测**：含饱和盐水或乙醚的保