DB22-T 1985-2013 饲料中无机砷的测定 液相色谱-原子荧光光谱法.docxVIP

DB22T饲料中无机砷的测定液相色谱原子荧光光谱法

本标准规定了饲料中无机砷的测定方法——液相色谱原子荧光光谱法。该方法适用于各类饲料原料、配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混合饲料中无机砷含量的测定。

无机砷作为高毒性物质，在饲料中的存在对动物健康及食品安全构成潜在威胁。为保障饲料产品质量安全，规范饲料中无机砷的检测方法，特制定本标准。本标准采用液相色谱分离技术与原子荧光光谱检测相结合的方法，具有灵敏度高、选择性好、准确可靠等特点，能够满足饲料中痕量无机砷的检测需求。

本标准所规定的方法原理为：试样经提取后，用液相色谱分离无机砷形态（三价砷和五价砷），分离后的各组分经原子荧光光谱仪检测，根据保留时间和峰面积进行定性和定量分析。方法检出限为0.01mg/kg，定量限为0.03mg/kg，线性范围为0.05μg/L~10μg/L，加标回收率为85%~105%。

2规范性引用文件

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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样方法

GB/T20195动物饲料试样的制备

JJG939原子荧光光度计检定规程

3原理

试样中的无机砷经盐酸溶液提取，离心分离后取上清液，通过阴离子交换色谱柱进行分离，以磷酸氢二铵磷酸二氢铵缓冲溶液为流动相，将三价砷[As(III)]和五价砷[As(V)]有效分离。分离后的砷形态在酸性介质中与硼氢化钾反应砷化氢气体，由氩气载入原子化器中原子化，在砷空心阴极灯的激发下产生原子荧光，其荧光强度与砷浓度成正比，与标准系列比较定量。

4试剂和材料

除非另有说明，本标准所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1盐酸（HCl）：优级纯，ρ=1.19g/mL。

4.2硼氢化钾（KBH4）：纯度≥95%。

4.3氢氧化钾（KOH）：优级纯。

4.4磷酸氢二铵[(NH4)2HPO4]：优级纯。

4.5磷酸二氢铵[NH4H2PO4]：优级纯。

4.6硫脲（CH4N2S）：分析纯。

4.7抗坏血酸（C6H8O6）：分析纯。

4.8盐酸溶液（1+1）：将盐酸（4.1）与水等体积混合。

4.9盐酸溶液（5+95）：量取50mL盐酸（4.1），用水稀释至1000mL。

4.10硼氢化钾溶液（20g/L）：称取2.0g氢氧化钾（4.3）溶于约200mL水中，加入20.0g硼氢化钾（4.2），溶解后用水稀释至1000mL，混匀。现用现配。

4.11磷酸氢二铵磷酸二氢铵缓冲溶液（15mmol/L，pH=6.0）：称取1.98g磷酸氢二铵（4.4）和1.15g磷酸二氢铵（4.5）溶于约800mL水中，用盐酸溶液（4.8）或氢氧化钠溶液调节pH至6.0，用水稀释至1000mL，混匀。经0.45μm滤膜过滤，超声脱气后使用。

4.12预还原剂：称取5.0g硫脲（4.6）和5.0g抗坏血酸（4.7）溶于100mL水中，混匀。现用现配。

4.13三价砷标准储备溶液[As(III)，1000mg/L]：采用国家有证标准物质，或称取1.3200g经105℃干燥2h的三氧化二砷（As2O3，优级纯）于烧杯中，加入10mL氢氧化钠溶液（100g/L）溶解，用盐酸溶液（4.8）中和至微酸性，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

4.14五价砷标准储备溶液[As(V)，1000mg/L]：采用国家有证标准物质，或称取1.5340g砷酸氢二钠（Na2HAsO4·7H2O，优级纯）溶于水，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

4.15三价砷标准使用溶液[As(III)，1.0mg/L]：准确吸取1.0mL三价砷标准储备溶液（4.13）于1000mL容量瓶中，加入10mL预还原剂（4.12），用盐酸溶液（4.9）稀释至刻度，混匀。现用现配。

4.16五价砷标准使用溶液[As(V)，1.0mg/L]：准确吸取1.0mL五价砷标准储备溶液（4.14）于1000mL容量瓶中，加入10mL预还原剂（4.12），用盐酸溶液（4.9）稀释至刻度，混匀。现用现配。

4.17混合标准使用溶液[As(III)+As(V)，各0.1mg/L]：分别吸取10.0mL三价砷标准使用溶液（4.15）和五价砷标准使用溶液（4.16）于100mL容量瓶中，用盐酸溶液（4.9）稀释至刻度，混匀。现用现配。

4.18微孔滤膜：0.45μm，水系。

5仪器和设备

5.1液相色谱原子荧光光谱联用仪：由液相色谱仪、原