DB32T 5245—2025 猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测技术规范.docxVIP

ICS11.220

CCSB41

江苏省地方标准

DB32/T5245—2025

猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测技术规范

Technicalspecificationsofcellularimmunoassaysforporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus

2025?10?30发布 2025?11?30实施

江苏省市场监督管理局 发布

中国标准出版社 出版

DB32/T5245—2025

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由江苏省农业农村厅提出并组织实施。

本文件由江苏省畜牧业标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：江苏立华食品集团股份有限公司、江苏省农业科学院、立华南京农业产业研究院有限公司。

本文件主要起草人：张海涛、张雪寒、罗燕、李彬、张双玉、尹丽萍、丁小燕、赵永祥、孟宪臣、杨铜、汝晓飞、祁晓晓、汤子澈、郄博、常长琳、李昌明、武玮、韩宁宁、张泰康、许盛海。

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DB32/T5245—2025

猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测技术规范

范围

本文件规定了猪繁殖与呼吸综合征病毒MHC肽四聚体细胞免疫检测技术的试剂及仪器、质量控制和结果判定，描述了相应的检测方法。

本文件适用于SLA?1*04∶01∶01型猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测、疫苗免疫效力评价和病毒感染的早期诊断，其他基因型猪的相关检测方法可参照确立。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T18090 猪繁殖与呼吸综合征诊断方法

GB19489 实验室生物安全通用要求

术语、定义和缩略语

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

主要组织相容性复合体 majorhistocompatibilitycomplex；MHC

一组编码动物主要组织相容性抗原的基因群的统称。

SLA?1等位基因 swineleukocyteantigen；SLA

基因座上的不同形式的基因。

注1：SLA是猪的MHC。

注2：SLA?1是SLA系统中的一个基因座。

四聚体 tetramer

一种由四个MHC分子单体与一条抗原肽结合后，再与荧光标记物连接形成的多聚体蛋白复合物。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

APC：别藻蓝蛋白（Allophycocyanin）

BirA：生物素连接酶（Biotin?ProteinLigaseA）

CTL：细胞毒性T淋巴细胞（CytotoxicTLymphocyte）

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DMSO：二甲基亚砜（Dimethylsμlfoxide）

FACS：流式细胞荧光分选技术（FlμorescenceActivatingCellSorter）FITC：异硫氰酸荧光素（FlμoresceinIsothiocyanateIsomer）

FSC：前向角散射光（ForwardScatter）

PBS：磷酸盐缓冲液（PhosphateBμfferedSaline）

PRRS：猪繁殖与呼吸综合征（PorcineReprodμctiveAndRespiratorySyndrome）

PRRSV：猪繁殖与呼吸综合征病毒（PorcineReprodμctiveAndRespiratorySyndromeVirμs）PBMC：外周血单个核细胞（PeripheralBloodMononμclearCell）

R?PE：藻红蛋白（R?Phycoerythrin）SSC：侧向散射光（SideScatter）TCR：T细胞受体（TCellReceptor）

主要器材

真空抗凝管。

5mL或10mL的无菌注射器。

10mL或15mL的透明无菌离心管。

一次性巴氏吸管。

1000μL无菌长枪头。

可控温水平离心机。

流式细胞仪。

精密可调移液器，1μL~10μL、20μL~200μL、100μL~1000μL。

流式管或1.5mL离心管。

流式管管架或双面离心管架。

用于覆盖1.5mL离心管板架或流式管的锡箔纸，避光用途。

冷藏展示柜。

细胞冻存管。

血细胞计数板。

倒置光学显微镜。

主要试剂

除另有规定外，所有试剂应为分析纯。

猪外周血单个核细胞分离液。