第三章植物脱毒技术.pptVIP

（六）化学处理许多化学药品（包括嘌呤、嘧啶类似物、氨基酸、抗菌素等）在植物体内和植物叶片内，进行其抑制病毒的增殖或使之不活化的测定，在某种程度上抑制了病毒的增值或不活化。整株植物用化学疗法不能除去病毒，但离体培养和原质体培养效果明显。第30页，共47页，星期日，2025年，2月5日第三节脱毒苗的鉴定（一）指示植物检测法（二）抗血清检测法（三）酶联免疫吸附检测法（四）其它鉴定方法第31页，共47页，星期日，2025年，2月5日（一）指示植物检测法指示植物检测是利用病毒在植物体上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的依据，也叫枯斑测定法。这种专门用以产生局部病斑的寄主称为指示植物，又称鉴别寄主。第32页，共47页，星期日，2025年，2月5日1.汁液涂抹法：待鉴试管苗取幼叶1-3g加水和磷酸缓冲液研磨纱布过滤指示植物上涂一薄层金刚砂手指蘸滤液摩擦5min后冲去叶面汁液和金刚砂至于温室中2-6天观察没有出现不含病毒出现枯斑有病毒第33页，共47页，星期日，2025年，2月5日第三章植物脱毒技术第1页，共47页，星期日，2025年，2月5日第一种类型为曾经或正在大面积或高比率发生，并造成严重为害的植原体病害，主要包括枣疯病和泡桐丛枝病。第二类型为局部或零星发生病害类型，山楂丛枝病严重地区约占20%左右。桃树黄化病和红叶病的发生面积较大，第三种类型为国内外引种或国内苗木调运而传入病害类型，比较典型的为从以色列引进的樱桃扁枝病和黄化病。1995年北京中以示范农场从以色列引进一年生的经嫁接的6个欧洲樱桃品系的苗木3500株，栽植当年即发现患带化病苗木，1995～1996年度的发病率为3%。在从国内其它地区引入的樱桃、枣树、泡桐等新品种苗木上也都发现带病苗木。

第一节植物脱毒的意义一、病毒病危害第2页，共47页，星期日，2025年，2月5日二、植物脱毒的意义“脱毒苗”或“无病毒苗”，是指不含有该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物体内的存在表现为阴性反应的苗木。通过植物组织培养方法生产无病毒种苗可以同时除去真菌、细菌和线虫的寄生，因此产量大幅度增加，最高可增产300％，平均增产也在30％以上。枣疯病辣椒病毒病番茄病毒病第3页，共47页，星期日，2025年，2月5日第二节植物脱毒方法一、茎尖分生组织培养脱毒二、热处理脱毒三、热处理结合茎尖脱毒四、其它脱毒方法第4页，共47页，星期日，2025年，2月5日一、茎尖分生组织脱毒(一）通过茎尖培养脱毒的原理1、病毒在植物体内的分布茎尖和根尖分生组织不含病毒粒子或病毒浓度很低，是因为病毒在寄主植物体内随着维管系统转移，在根尖与茎尖分生组织中没有维管束系统，病毒运动很困难。病毒在寄主茎尖分生组织中的转移速度落后于茎尖的生长速度，导致顶端分生组织附近病毒浓度低，甚至不带病毒，通过茎尖（根尖）离体培养便可获得无病毒再生植株。2、茎尖大小与脱毒效果用于脱毒的茎尖外植体可以是顶端分生组织即生长点，最大直径0.1mm，也可以是带1－3个叶原基的茎尖。茎尖外植体的大小与脱毒效果成反比。外植体过小，存活困难，生长缓慢，操作难度大。但茎尖外植体过大，脱毒效果差。通常以带1－3个幼叶原基的茎尖作外植体较合适。第5页，共47页，星期日，2025年，2月5日第6页，共47页，星期日，2025年，2月5日第7页，共47页，星期日，2025年，2月5日第8页，共47页，星期日，2025年，2月5日第9页，共47页，星期日，2025年，2月5日（二）茎尖脱毒的方法1、取样与消毒取病害相对较轻的植株，可以从选定的植株上取顶芽梢段进行消毒接种。也可从室内培养1－2个月并进行热处理的盆栽扦插苗上，采顶芽与侧芽消毒接种，消毒方法：取顶芽梢段3－5cm，剥去大叶片，自来水冲洗，75％酒精浸泡30秒左右，用0.1％升汞消毒10分钟，最后用无菌水冲洗4－5次。第10页，共47页，星期日，2025年，2月5日2、拨取茎尖与接种在超净工作台上，用解剖刀将仔细剥离幼叶，至出现裸露的生长点，用刀尖切下带1－2个叶原基的生长点，将切下的茎尖转移至培养基上，每管接1－2个茎尖。第11页，共47页，星期日，2025年，2月5日第12页，共47页，星期日，2025年，2月5日第13页，共47页，星期日，2025年，2月5日第14页，共47页，星期日，2025年，2月5日3、培养接种后的材料在25±2℃，每天光照1